EKSTRAKSI DAN UJI STABILITAS ZAT WARNA ALAMI DARI DAUN
JATI (Tectona grandis Linn.F.) SEBAGAI BAHAN PENGGANTI
PEWARNA SINTETIK PADA PRODUK MINUMAN
Skripsi
Diajukan Untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Meraih Gelar Sarjana Sains
Jurusan KimiaPada Fakultas Sains dan Teknologi
UIN Alauddin Makassar
Oleh:
DIAN MUTMAINNAH
NIM: 60500114033
FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI
UNIVERSITAS ISLAM NEGERI ALAUDDIN
MAKASSAR
2018
ii
PERNYATAAN KEASLIAN SKRIPSI
Mahasiswa yang bertandatangan di bawah ini:
Nama : Dian Mutmainnah
NIM : 60500114033
Tempat/Tgl. Lahir : Pao/24 Desember 1997
Jurusan : Kimia
Fakultas : Sains dan Teknologi
Alamat : Jl. S. Dg Ngemba
Judul : Ekstraksi dan Uji Stabilitas Zat Warna Alami dari Daun Jati
(Tectona grandis Linn. F.) sebagai Bahan Pengganti Pewarna
Sintetik pada Produk Minuman
Menyatakan dengan sesungguhnya dan penuh kesadaran bahwa skripsi ini benar
adalah hasil karya sendiri. Jika dikemudian hari terbukti bahwa ia merupakan
duplikat, tiruan, plagiat, atau dibuat oleh orang lain, sebagian atau seluruhnya, maka
skripsi dan gelar yang diperoleh karenanya batal demi hukum.
Gowa, 10 November 2018
Dian Mutmainnah
NIM: 60500114033
iii
iv
KATA PENGANTAR
Alhamdulillah Wa Syukurillah, penulis panjatkan kehadirat Allah SWT yang
memberikan rahmat dan hidayah-Nya kepada penulis sehingga dapat menyelesaikan
skripsi ini dengan baik yang berjudul “Ekstrasi dan Uji Stabilitas Zat Warna Alami
dari Daun Jati (Tectona grandis Linn. F.) sebagai Bahan Pengganti Pewarna Sintetik
pada Produk Minuman”. Salam dan shalawat penulis kirimkan kepada Nabi
Muhammad Saw., beserta keluarga dan sahabat beliau yang telah membawa kebaikan
dan cahaya kepada umatnya.
Skripsi disusun sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana sains
pada Jurusan Kimia Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri Alauddin
Makassar.
Penghargaan dan Terima kasih yang setulus dan sebesar-besarnya kepada
kedua orang tua tercinta, Ayah Rappung dan Ibu Sitti Wardi serta saudara dan semua
keluarga atas segala limpahan do’a, kesabaran, kasih sayang, serta perjuangan yang
telah diberikan dalam membesarkan dan mendidik penulis hingga saat ini. Semoga
Allah SWT, memberikan kesehatan, keselamatan dan keberlimpahan berkah kepada
mereka orang-orang yang berjasa dalam kehidupan penulis.
Terima kasih pula penulis ucapkan kepada bapak/ibu:
1. Bapak Prof. Dr. Musafir Pababbari, M.Si selaku Rektor Universitas Islam
Negeri Alauddin Makassar, Bapak Prof. Dr. Mardan, M.Ag, Bapak Prof. Dr.
H. Lomba Sultan, M.Ag dan Ibu Prof. Siti Aisyah, M.A.,Ph.D selaku Wakil
Rektor I, II dan III.
2. Bapak Prof. Dr. H. Arifuddin, M. Ag selaku Dekan Fakultas Sains dan
Teknologi UIN Alauddin Makassar, Ibu Dr. Wasilah, ST.,MT, Bapak Dr. M.
v
Thahir Maloko, M.Hi dan Bapak Dr. A.M. Suarda, S.Pt.,M.Si selaku Wakil
Dekan I,II dan III.
3. Ibu Sjamsiah, S.Si, M.Si., Ph.D dan Ibu Dr. Rismawati Sikanna, M.Si selaku
Ketua Jurusan dan Sekretaris Jurusan Kimia Fakultas Sains dan Teknologi
UIN Alauddin Makassar.
4. Ibu Dra. Sitti Chadijah, M.Si dan Ibu Ummi Zahra, S.Si.,M.Si selaku
Pembimbing I dan Pembimbing II yang telah memberikan banyak masukan
dan arahan baik untuk penyusunan skripsi ini kepada penulis.
5. Ibu Aisyah, S.Si.,M.Si dan Bapak Dr. Tasmin Tangareng, M.Ag selaku
Penguji I dan Penguji II yang sudah banyak memberikan masukan dan arahan.
6. Para Laboran Jurusan Kimia, Kak Awaluddin S.Si., M.Si, Kak Fitria Aziz,
S.Si., S.Pd, Kak Nuraini S.Si, Kak Ismawati S.Si, Kak Andi Nur Rahma S.Si,
dan kepada Kak Ahmad Yani, S.Si.
7. Para saudaraku, kakak Nadiati, Rukiati dan Risnawati atas segala doa dan
dukungan yang diberikan kepada penulis.
8. Para sahabatku (Seluruh angkatan Kimia 2014) terkhusus Selviana Rosanti,
Ummul Khaerah, Desy Nurhasanah Sari, Azmalaeni Rifkah dan Muh.
Ashabul Kahfi atas segala semangat yang diberikan kepada penulis.
9. Para rekan penelitianku Sari Ningsih dan Indah Fitriyani yang selalu
mengajarkan arti kesabaran di setiap kegagalan yang dialami selama
penelitian.
10. Para sahabatku di Sekolah Semesta Indonesia terkhusus kakak Andi
Meldayasari, Nursyahfitri, Nurrun Qaizul Mardyah, Mutasimah dan
Kahrunianti atas energi positif yang diberikan kepada penulis.
vi
11. Para sahabatku di KKN angkatan 58 terkhusus di posko Muladimeng Sayyid
Abu Azis, Wanasari, Nurhasana, A. Akmal dan Muh. Guntur atas segala
bantuan yang diberikan mulai dari awal penelitian hingga penyusunan skripsi
ini.
12. Para sahabatku dari kecil terkhusus A. Algi Paris, Dwi Handayani Dewi,
Sulpiatu Nur, Darmiati, Darmawati, Jusniar atas semangat dan bantuan yang
diberikan kepada penulis.
Dan terima kasih kepada seluruh keluarga dan semua pihak yang tidak
disebutkan namanya satu persatu atas bantuan dan doa yang diberikan penulis, semoga
Allah memberikan kebaikan kepada kalian.
Akhir kata, tiada harapan yang paling indah selain harapan bahwa apa yang
penulis lakukan selama ini untuk penyusunan skripsi ini dapat bernilai positif untuk
pengembangan ilmu pengetahuan dan bernilai ibadah disisi Allah SWT. Amin.
Wassalamualaikum Wr. Wb.
Samata-Gowa, November 2018
Penulis
vii
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ........................................................................................... i
PERNYATAAN KEASLIAN SKRIPSI ............................................................ ii
LEMBAR PENGESAHAN ............................................................................ iii
KATA PENGANTAR ................................................................................. iv-vi
DAFTAR ISI ............................................................................................ vii-viii
DAFTAR TABEL ........................................................................................... ix
DAFTAR GAMBAR ......................................................................................... x
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... xi
ABSTRAK ........................................................................................................ xi
ABSTRACT ..................................................................................................... xii
BAB I PENDAHULUAN ............................................................................... 1-5
A. Latar Belakang ........................................................................................ 1
B. Rumusan Masalah ................................................................................... 4
C. Tujuan Penelitian ................................................................................. 4-5
D. Manfaat Penelitian .................................................................................. 5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ................................................................. 6-20
A. Tanaman Jati ........................................................................................... 6
B. Zat Warna ................................................................................................ 8
1. Pengertian Zat warna......................................................................... 8
2. Penggolongan Zat Warna .................................................................. 8
a. Pewarna Sintetik.......................................................................... 8
b. Pewarna Alami ............................................................................ 9
C. Maserasi ................................................................................................ 13
1. Pengertian Maserasi ........................................................................ 13
viii
2. Faktor yang Mempengaruhi Maserasi ............................................. 14
3. Pelarut yang Digunakan .................................................................. 15
D. Pengeringan Beku (Freeze drying) ...................................................... 16
E. Uji Stabilitas .......................................................................................... 18
F. Spektofotometer UV-Vis ................................................................. 19-20
BAB III METODE PENELITIAN ........................................................... 21-26
A. Waktu dan Tempat ................................................................................ 21
B. Alat dan Bahan ...................................................................................... 21
C. Prosedur Kerja ................................................................................. 22-26
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................... 27-43
A. Hasil Penelitian ................................................................................ 27-32
B. Pembahasan ..................................................................................... 32-43
BAB V PENUTUP ........................................................................................... 44
A. Kesimpulan ........................................................................................... 44
B. Saran ...................................................................................................... 44
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................. 43-46
LAMPIRAN-LAMPIRAN ........................................................................ 49-77
DAFTAR RIWAYAT HIDUP ....................................................................... 78
ix
DAFTAR TABEL
Tabel 2.1 Spektrum Golongan Pigmen Tumbuhan .................................................. 20
Tabel 4.1 Hasil Ekstrak Daun Jati (Tectona grandis Linn. F.) ................................ 27
Tabel 4.2 Hasil Uji Fitokimia .................................................................................. 28
Tabel 4.3 Hasil Uji Kadar Total Antosianin ............................................................ 29
Tabel 4.4 Hasil Uji Kadar Air .................................................................................. 29
Tabel 4.5 Hasil Uji Kadar Abu ................................................................................ 30
x
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Tanaman Jati .......................................................................................... 7
Gambar 2.2 Struktur Antosianin Sianidin ................................................................ 10
Gambar 2.3 Struktur Alkaloid .................................................................................. 10
Gambar 2.4 Struktur Tanin Terhidrolisis ................................................................. 11
Gambar 2.5 Struktur Tanin Terkondensasi .............................................................. 11
Gambar 2.6 Struktur Saponin Triterpenoid .............................................................. 12
Gambar 2.7 Freeze Drying ....................................................................................... 17
Gambar 2.8 Mekanisme Terjadinya Pengeringan Beku .......................................... 17
Gambar 4.1 Grafik Pengaruh Suhu .......................................................................... 30
Gambar 4.2 Grafik Pengaruh pH ............................................................................. 30
Gambar 4.3 Grafik Pengaruh Lama Penyimpanan .................................................. 31
Gambar 4.4 Grafik Nilai Rata-Rata Kesukaan ......................................................... 31
Gambar 4.5 Reaksi Antosianin dengan Asam Klorida ............................................ 34
Gambar 4.6 Reaksi Antosianin dengan NaOH ........................................................ 35
Gambar 4.7 Reaksi Alkaloid dengan Pereaksi Wagner ........................................... 36
Gambar 4.8 Reaksi Tanin dengan FeCl3 ................................................................. 36
Gambar 4.9 Reaksi Saponin dalam Air .................................................................... 37
Gambar 4.10 Reaksi Perubahan Struktur Antosianin pada Perbedaan pH ................ 40
xi
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1 Skema Penelitian .................................................................................. 49
Lampiran 2 Bagan Prosedur Kerja ...................................................................... 50-55
Lampiran 3 Pembuatan Pereaksi ......................................................................... 56-58
Lampiran 4 Perhitungan Hasil Kadar Antosianin ............................................... 59-60
Lampiran 5 Perhitungan Hasil Analisis Proksimat ............................................. 61-62
Lampiran 6 Uji Organoleptik Menggunakan ANOVA ....................................... 63-68
Lampiran 7 Dokumentasi Preparasi Sampel ....................................................... 69-70
Lampiran 8 Dokumentasi Uji Kualitatif ............................................................. 71-72
Lampiran 9 Dokumentasi Uji Kuantitatif Antosianin .............................................. 73
Lampiran 10 Dokumentasi Analisis Proksimat..................................................... 74-75
Lampiran 11 Dokumentasi Uji Stabilitas ................................................................... 76
Lampiran 12 Dokumentasi Uji Organoleptik ............................................................. 77
xi
ABSTRAK
Nama : Dian Mutmainnah
Nim : 60500114033
Judul : Ekstraksi dan Uji Stabilitas Zat Warna Alami dari Daun Jati
(Tectona grandis Linn. F.) sebagai Pengganti Pewarna Sintetik
Pada Produk Minuman
Pewarna alami sebagai alternatif pewarna yang ramah lingkungan pada minuman. Penelitian ini menggunakan zat warna daun tanaman jati sebagai pewarna alami. Daun jati memiliki manfaat sebagai antibakteri, antitoksik dan antioksidan. Zat warna diperoleh dari proses ekstraksi secara maserasi dengan pelarut etanol. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kandungan golongan zat warna dari daun jati, mengetahui stabilitas serbuk ekstrak daun jati pada berbagai perlakuan pengolahan pangan meliputi suhu, pH dan lama penyimpanan menggunakan spektrofotometer UV-Vis serta sifat organoleptik pada produk minuman. Hasil penelitian menunjukkan bahwa golongan zat warna yang terkandung pada daun jati adalah antosianin dengan kadar yang diperoleh sebesar 3,34 mg/L. Hasil pengujian stabilitas menunjukkan bahwa adanya perbedaan perlakuan suhu, pH dan lama penyimpanan mempengaruhi kestabilan serbuk ekstrak daun jati, semakin tinggi nilai suhu, pH dan lama penyimpanan maka stabilitas semakin menurun. Kondisi paling stabil pada zat pewarna antosianin adalah suhu 40℃, pH 2 dan penyimpanan selama 2 hari. Pada pengujian sifat organoleptik, memiliki pengaruh terhadap warna disukai pada konsentrasi 0,002 g/mL air sedangkan terhadap aroma dan rasa disukai pada konsentrasi 0,002 g/mL dan 0,001 g/mL dengan menggunakan uji ANOVA.
Kata Kunci: Pewarna Alami, Antosianin, Tectona grandis, Stabilitas
xii
ABSTRACT
Name : Dian Mutmainnah
Nim : 60500114033
Title : Extraction and Stability Test of Natural Dyes from Teak Leaves
(Tectona grandis Linn. F.) as a Substitute of Synthetic Dyes in
Beverage Products
Natural dyes as an alternative to environmentally friendly dyes in beverages. This
study uses leaf dyes of teak plants as natural dyes. Teak leaves have benefits as
antibacterial, antitoxic and antioxidant. Dyes are obtained from the extraction process
by maceration with ethanol solvents. This study aims to determine the content of the
dye group from teak leaves, knowing the stability of teak leaf extract powder in various
food processing treatments including temperature, pH and storage time using a
spectrophotometer UV-Vis and organoleptic properties of beverage products. The
results showed that the class of dyes contained in teak leaves was anthocyanin with the
obtained levels of 3.34 mg/L. The results of stability testing showed that the
differences in the treatment of temperature, pH and storage time affected the stability
of teak leaf extract powder, the higher the value of temperature, pH and storage time,
the lowered the stability. The most stable conditions for anthocyanin dyes are 40 ℃,
pH 2 and storage for 2 days. In testing organoleptic properties, it has an influence on
the preferred color at a concentration of 0.002 g/mL of water while the aroma and taste
are preferred at concentrations of 0.002 g/mL and 0.001 g/mL using the ANOVA test.
Keywords: Natural dyes, Anthocyanins, Tectona grandis, Stability
1
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Indonesia sebagai salah satu negara yang banyak diminati wisatawan karena
keindahan alam dan keanekaragaman kulinernya yang menggugah selera. Kuliner
Indonesia menarik perhatian publik karena meninggalkan rasa dan kecintaan
tersendiri dari wisatawan. Kuliner yang diharapkan memiliki cita rasa enak,
penampilan menarik dan harga yang terjangkau. Salah satu aspek yang penting pada
kuliner adalah penampilan. Untuk menambah penampilannya seringkali ditambah
dengan bahan tambahan makanan seperti pewarna (Supratrini, dkk., 2011: 208-209).
Dewasa ini, penggunaan pewarna sangat banyak tanpa memperhatikan
keamanan ataupun dampaknya bagi kesehatan. Menurut Undang-Undang Pangan RI
Nomor 7 Tahun 1996, keamanan pangan didefinisikan sebagai kondisi upaya yang
diperlukan untuk mencegah pangan dari kemungkinan cemaran biologis, kimia dan
benda lain yang dapat mengganggu, merugikan dan membahayakan kesehatan
manusia (Saati, 2014). Salah satu zat pewarna yang banyak digunakan oleh
masyarakat pada bahan pangan misalnya zat pewarna sintetik. Pewarna sintetik
digunakan karena lebih praktis, lebih ekonomis serta menghasilkan warna yang lebih
stabil dan beragam (Armanzah, dkk., 2016: 1). Ada beberapa pewarna sintetik yang
dilarang dan sangat berpengaruh terhadap kesehatan karena terbuat dari bahan yang
berbahaya dan tidak ramah lingkungan. Konsumsi secara terus menerus akan
menyebabkan kerusakan pada organ tubuh (Fathinatullabibah, dkk., 2014: 60),
bahkan dapat menyebabkan kematian (Yuniwati, dkk., 2012: 257). Penggunaan
pewarna sintetik seperti Rhodamin B, Methanyl Yellow dan Amaranth pada makanan
2
dan minuman dapat menyebabkan terjadinya kanker serta kerusakan ginjal dan hati
(Pujilestari, 2015: 93). Alternatif terhadap pewarna sintetik adalah pewarna yang
tidak memiliki dampak buruk bagi kesehatan tubuh misalnya pewarna alami.
Pewarna alami sebagai suatu alternatif yang tidak berbahaya bagi kesehatan
konsumen, dapat diperbaharui (renewable), mudah terdegradasi dan ramah
lingkungan (Yernisa, dkk., 2013: 190). Pewarna alami dapat diperoleh dari tumbuhan
maupun hewan. Tumbuhan yang banyak terdapat di sekitar kita memiliki zat
pewarna alami seperti klorofil, karotenoid, tanin dan antosianin (Arifah dan Chairul,
2016: 18). Zat pewarna tersebut dapat ditemukan pada bagian-bagian tumbuhan
seperti daun, batang, buah, bunga maupun biji. Salah satu tumbuhan yang dapat
berpotensi sebagai pewarna alami adalah daun jati (Tectona grandis Linn. F.). Selain
itu, daun jati belum dimanfaatkan secara maksimal oleh masyarakat, bahkan hanya
menjadi limbah. Daun jati mengandung zat pewarna antosianin yang dapat
memberikan warna biru, ungu, violet, magenta, merah dan oranye (Fathinatullabibah,
dkk., 2014: 60).
Hal ini merupakan salah satu tanda kekuasaan Allah SWT, sebagaimana yang
dijelaskan dalam QS. Az-Zumar/39:21 yang berbunyi:
Terjemahnya:
“Apakah engkau tidak memperhatikan, bahwa Allah menurunkan air dari langit, lalu diaturnya menjadi sumber-sumber air di bumi, kemudian dengan air itu ditumbuhkanNya tanam-tanaman yang bermacam-macam warnanya, kemudian mejadi kering, lalu engkau melihatnya kekuning-kuningan,
3
kemudian dijadikanNya hancur berderai-derai. Sungguh, pada yang demikian itu terdapat pelajaran bagi orang-orang yang mempunyai akal sehat”.
Ayat di atas menyatakan bahwa air yang dijatuhkan dari langit dialirkan ke
dalam tanah dan akan tumbuh tanaman-tanaman yang bermacam-macam jenis,
bentuk, rasa dan warnanya. Tanaman-tanaman tersebut dapat dimanfaatkan sebagai
sumber zat warna (Shihab, M. Quraish, 2002: 211).
Tanaman jati terutama pada daun jati muda memiliki kandungan beberapa
senyawa zat pewarna alami seperti antosianin, pheophiptin, karotenoid dan klorofil.
Arivani (2010) dalam penelitiannya menyebutkan bahwa daun jati muda memiliki
kandungan beberapa senyawa pigmen terutama antosianin. Senyawa antosianin
merupakan senyawa metabolit sekunder dari famili flavonoid yang aman untuk
dikonsumsi, tidak menyebabkan efek samping seperti keracunan, gangguan organ
pencernaan dan tidak menimbulkan mutasi genetik (Armanzah dan Tri, 2016: 3).
Antosianin sebagai pigmen zat warna alami yang memiliki sifat polar yang akan larut
dengan baik pada pelarut-pelarut polar. Antosianin memiliki kemampuan sebagai
antioksidan. Oleh karena itu, daun jati muda berpotensi sebagai sumber zat warna
alami yang baik bagi kesehatan. Kestabilan zat warna alami dari daun jati dapat
dipengaruhi oleh beberapa faktor di antaranya yaitu pengaruh pH, cahaya dan suhu
(Saraswati dan Suci, 2009: 2).
Senyawa antosianin yang terdapat pada daun jati dapat diperoleh dengan cara
ekstraksi seperti ekstraksi secara maserasi. Keuntungan menggunakan metode ini
yaitu lebih sederhana dengan teknik merendam bahan selama beberapa hari dengan
pelarut yang sesuai. Pelarut yang dapat digunakan untuk memperoleh senyawa
antosianin adalah etanol karena kemampuannya yang lebih efektif dalam menarik
senyawa antosianin tersebut (Kristiana, dkk., 2012: 106).
4
Zat warna yang diperoleh dari ekstrak daun jati (Tectona grandis, Linn. F.)
dalam penelitian Hermawati, dkk (2015), dapat diaplikasikan sebagai pewarna alami
pada es krim. Sehingga pada penelitian ini zat warna alami yang diperoleh dari daun
jati muda akan diaplikasikan pada produk minuman.
Berdasarkan penjelasan di atas, maka pada penelitian ini akan dilakukan
ekstraksi dan uji stabilitas zat warna alami dari daun jati (Tectona grandis, Linn. F.)
untuk mengetahui jenis zat warna yang terkandung, stabilitasnya terhadap pengaruh
pH, suhu dan lama penyimpanan serta menguji sifat organoleptiknya pada produk
minuman.
B. Rumusan Masalah
Adapun rumusan masalah pada penelitian ini adalah sebagai berikut:
1. Bagaimana hasil identifikasi zat warna alami pada daun jati (Tectona grandis
Linn. F.) ?
2. Bagaimana stabilitas zat warna alami dari daun jati (Tectona grandis Linn. F.)
terhadap pengaruh pH, suhu dan lama penyimpanan ?
3. Bagaimana uji organoleptik zat warna alami dari daun jati (Tectona grandis
Linn. F.) pada produk minuman ?
C. Tujuan penelitian
Adapun tujuan dari penelitian ini adalah sebagai berikut:
1. Untuk mengetahui jenis zat yang dominan sebagai pewarna alami pada daun
jati (Tectona grandis Linn. F.).
2. Untuk mengetahui stabilitas zat warna alami dari daun jati (Tectona grandis
Linn. F.) terhadap pengaruh pH, suhu dan lama penyimpanan.
3. Untuk mengetahui uji organoleptik zat warna alami dari daun jati (Tectona
grandis Linn. F.) pada produk minuman.
5
D. Manfaat Penelitian
Adapun manfaat penelitian ini yaitu:
1. Dapat memberikan informasi bahwa daun jati (Tectona grandis Linn. F.)
dapat dijadikan sebagai bahan pengganti pewarna sintetik pada produk
minuman.
2. Diharapkan dapat memberikan manfaat dalam mengungkap potensi daun jati
(Tectona grandis Linn. F.) sebagai zat warna alami.
3. Sebagai bahan referensi bagi para peneliti yang ingin melakukan penelitian
lebih lanjut tentang zat warna alami dari daun jati (Tectona grandis Linn. F.).
6
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Tanaman Jati (Tectona grandis Linn. F.)
Indonesia termasuk sebagai negara tropis yang memiliki beragam jenis
tanaman. Jenis tanaman tersebut ada yang ditanam dengan sengaja oleh manusia dan
ada yang tumbuh secara liar di hutan. Tanaman memiliki perannya masing-masing
baik pada bagian batang, daun, bunga, buah maupun bijinya. Tanaman yang dapat
dimanfaatkan salah satunya adalah tanaman jati.
Tanaman jati (Tectona grandis Linn. F.) merupakan salah satu jenis tanaman
pohon tropis yang paling banyak ditemukan di Asia Tenggara seperti Thailand, Laos,
Burma dan Indonesia. Indonesia memiliki pusat penanaman jati yang terletak
di pulau Jawa yaitu wilayah Jawa Timur, Jawa Tengah dan Jawa Barat. Selain di
Pulau Jawa, tanaman jati juga dapat ditemukan di beberapa tempat di Pulau
Sulawesi, Pulau Bali, Pulau Muna, Pulau Kalimantan, Pulau Sumatra dan Pulau
Sumbawa. Tanaman jati memiliki batang yang dapat digunakan sebagai kayu dalam
industri mebel (Murtina, dkk., 2015: 287). Menurut Siregar (2008: 3), dalam sistem
klasifikasi tanaman jati mempunyai penggolongan sebagai berikut:
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnoliopsida
Ordo : Lamiales
Famili : Verbenaceae
Genus : Tectona
Species : Tectona grandis Linn. F.
7
Tanaman jati secara morfologis memiliki tinggi yang dapat mencapai 30
sampai 45 meter. Apabila dilakukan pemangkasan, batang-batang yang bebas cabang
dapat mencapai antara 15 sampai 20 meter dengan diameter batang mencapai 220
cm. Kulit kayu berwarna kecoklatan atau abu-abu yang mudah terkelupas. Pangkal
batang berakar papan pendek dan bercabang sekitar 4 daun berbentuk seperti jantung
yang bulat dengan ujung yang meruncing, dengan ukuran panjang sekitar 20 sampai
50 cm dan lebar sekitar 15 sampai 40 cm serta memiliki permukaan yang berbulu.
Daun muda berwarna hijau, dapat dilihat pada gambar 2.1, sedangkan daun tua
keabu-abuan (Siregar, 2008: 3).
Gambar 2.1. Tanaman Jati (Tectona grandis Linn. F.)
(Sumber: Abfidah, 2014: 6)
Tanaman jati memiliki batang yang dapat dimanfaatkan pada berbagai
perusahaan kayu ataupun industri mebel, juga memiliki daun yang dapat dijadikan
sebagai sumber zat warna alami terutama pada daun jati muda. Daun jati muda
mengandung suatu senyawa pigmen antosianin yang dapat memberikan warna
merah, ungu bahkan merah gelap. Kandungan senyawa pigmen antosianin pada daun
jati ini dalam pemanfaatannya untuk pewarna alami yang aman bagi kesehatan
manusia maupun lingkungan (Kembaren, dkk., 2014: 192).
8
B. Zat Warna
1. Pengertian Zat Warna
Warna menjadi suatu faktor yang paling berpengaruh dalam menambah daya
tarik konsumen terhadap suatu produk sehingga penggunaan suatu zat warna sudah
semakin meningkat. Zat warna merupakan zat aditif yang digunakan dalam berbagai
industri seperti industri tekstil, kosmetik, obat-obatan maupun pangan (Arifah dan
Chairul, 2016: 18). Peraturan mengenai penggunaan zat pewarna yang diizinkan dan
yang dilarang untuk pangan diatur melalui SK Menteri Kesehatan RI Nomor
722/MenKes/Per/IX/88 mengenai Bahan Tambahan Makanan. Akan tetapi, sering
terjadi penyalahgunaan pemakaian zat pewarna pada produk pangan seperti zat
pewarna tekstil dan kulit (Purba, 2010: 6).
Bahan pewarna dapat digolongkan ke dalam tiga golongan yaitu bahan
pewarna sintesis, bahan pewarna anorganik dan bahan pewarna alami (Mortensen,
2006: 1477). Akan tetapi yang paling umum digunakan yaitu pewarna sintetik dan
pewarna alami.
2. Penggolongan Zat Warna
a. Pewarna Sintetik
Penggunaan pewarna sintetik saat ini sangat banyak karena lebih praktis, sifat
pewarnaannya yang lebih stabil dan seragam. Zat pewarna sintetik terdiri dari dua
yaitu zat pewarna sintetik yang diizinkan penggunaannya dan zat pewarna sintetik
yang dilarang penggunaannya. Zat pewarna sintetik yang diizinkan untuk pewarna
makanan oleh Food and Drug Administration (FDA) terdiri dari delapan yaitu alura
red (merah), erythrosine (merah), brilliant blue FCF (biru), indigo carmine (biru),
sunset yellow FCF (kuning), tartrazine (kuning), fast green FCF (hijau) dan benzyl
violet (ungu). Akan tetapi, penggunaan zat pewarna sintetik tersebut akan
9
menimbulkan efek terhadap kesehatan apabila penggunaannya melebihi ambang
batas (Noriko, dkk., 2011: 48).
Jenis pewarna sintetik yang sering disalahgunakan seperti Amarant,
Rhodamin B dan Methanyl Yellow yang merupakan pewarna sintetik tekstil yang
digunakan pada produk pangan akan sangat berbahaya terhadap kesehatan. Pewarna
sintetik tersebut pada umumnya digunakan pada minuman, sirup, es cendol, es
campur, es kelapa dan manisan (Saati, 2014: 2). Pewarna sintetik tersebut memiliki
sifat yang karsinogenik dan beracun bagi tubuh. Hal inilah yang menjadi
kekhawatiran akan keamanan penggunaan pewarna yang berbahaya sehingga
pewarna alami menjadi alternatif sebagai pewarna pada produk pangan yang aman
(Armanzah dan Tri, 2016: 2).
b. Pewarna Alami
Zat warna alami dapat diperoleh dari tumbuhan, binatang maupun
mikroorganisme (Aberoumand, 2011) dan yang paling banyak berasal dari
tumbuhan. Hampir semua bagian tumbuhan seperti bunga, buah, daun, biji, kulit,
batang dan akar apabila diekstraksi dapat menghasilkan zat warna (Pujilestari, 2015:
96). Zat warna tersebut berasal dari pigmen alam yang terkandung dalam tumbuhan.
Menurut Puspitarum, dkk, (2013: 7-8), pigmen zat pewarna alami dan
senyawa metabolit sekunder yang dapat diperoleh dari tumbuhan antara lain sebagai
berikut:
1) Flavonoid
Antosianin merupakan salah satu golongan senyawa flavonoid (Hidayah,
2013: 9). Antosianin memiliki fungsi sebagai zat antioksidan yang dapat
menyembuhkan penyakit degeneratif (Setiono dan Avriliana, 2013: 92). Antosianin
merupakan suatu molekul polar dengan kelompok hidroksil, karboksil, metoksil dan
10
glikolil terikat dengan cincin aromatik. Senyawa antosianin lebih mudah larut dengan
pelarut yang bersifat polar dibandingkan denga pelarut nonpolar (Xavier, dkk., 2008:
143). Antosianin sebagai sumber zat pewarna alami sangat aman bagi kesehatan.
Struktur salah satu jenis antosianin seperti sianidin dapat dilihat pada gambar berikut:
Gambar 2.2. Struktur Antosianin Sianidin
(Samber, 2013: 1)
2) Alkaloid
Alkaloid merupakan senyawa metabolit sekunder terbanyak yang memiliki
atom nitrogen yang ditemukan dalam jaringan tumbuhan dan hewan (Ningrum, dkk.,
2016: 231). Sebagian besar senyawa alkaloid bersumber pada tumbuhan. Alkaloid
dapat ditemukan pada berbagai bagian tanaman seperti akar, batang, daun, ranting,
bunga dan kulit batang. Alkaloid dapat digunakan sebagai obat anti diare, anti
malaria, anti diabetes dan anti mikroba. Alkaloid larut pada pelarut polar. Salah satu
struktur alkaloid dapat dilihat pada gambar berikut:
Gambar 2.3. Struktur Alkaloid
(Setyowati, 2014: 274)
11
3) Tanin
Tanin merupakan senyawa aktif metabolit sekunder yang banyak ditemukan
di alam. Senyawa tanin meiliki khasiat sebagai anti diare, anti bakteri dan anti
oksidan (Liberty, dkk., 2012: 6). Tanin memiliki dua jenis yaitu tanin terhidrolisis
dan tanin terkondensasi. Struktur tanin terhidrolisis dapat dilihat pada gambar
berikut:
Gambar 2.4. Struktur Tanin Terhidrolisis
(Tampubolom, 2011: 14)
Tanin terhidrolisis merupakan suatu polimer berupa asam elagat yang terikat
pada senyawa ester membentuk suatu molekul gula. Sedangkan tanin terkondensasi
merupakan polimer flavonoid yang dapat menghasilkan pigmen antosianidin melalui
pemecahan oksidatif dan alkohol panas (Krastianto, 2013: 8). Struktur tanin
terkondensasi dapat dilihat pada gambar berikut:
Gambar 2.5. Struktur Tanin Terkondensasi
(Kristianto, 2013: 8)
12
4) Saponin
Saponin merupakan suatu glikosida yang terbentuk dari campuran
karbohidrat sederhana dengan aglikon yang terdapat pada bermacam-macam
tanaman. Saponin memiliki karakteristik berupa buih sehingga ketika direaksikan
maka akan terbentuk buih yang dapat bertahan lama. Saponin mudah larut dalam air
dan paling cocok untuk pelarut etanol (Rachman, dkk., 2016: 2-3). Struktur saponin
dapat dilihat pada gambar berikut:
Gambar 2.6. Struktur Saponin Triterpenoid
(Illing, 2017: 72)
Menurut Putra, dkk (2014), manfaat pemberian zat pewarna pada produk
pangan yaitu sebagai berikut:
1) Memberikan kesan menarik bagi konsumen
Makanan ataupun minuman yang memiliki warna yang bagus akan yang
menyenangkan dan menarik banyak konsumen untuk membelinya.
2) Menyeragamkan warna makanan
Makanan ataupun minuman yang memiliki bermacam-macam warna akan
terlihat indah.
3) Menstabilkan warna
13
4) Menutupi perubahan warna selama penyimpanan
Makanan ataupun minuman dengan pemberian pewarna akan menutupi
perubahan warna akibat paparan cahaya, udara atau temperatur yang ekstrim
akibat proses pengolahan dan penyimpanan.
Zat warna alami memiliki keunggulan yang telah direkomendasikan sebagai
pewarna yang aman untuk kesehatan dan ramah terhadap lingkungan karena
mengandung komponen alami yang mempunyai nilai beban pencemaran yang relatif
rendah, mudah terdegradasi secara biologis dan tidak beracun (Fauziah dan Chairul,
2016: 23). Metode yang dapat digunakan untuk mengekstrak pigmen alam dari
tumbuhan yaitu dengan cara ekstraksi secara maserasi.
C. Maserasi
1. Pengertian Ekstraksi Maserasi
Ekstraksi pigmen atau pewarna alami pada tumbuhan dapat dilakukan dengan
cara mengekstrak bagian tumbuhan dengan menggunakan pelarut yang sesuai dengan
tingkat kepolaran suatu pigmen yang akan diambil (Pujilestari, 2015: 97). Ekstraksi
merupakan suatu proses yang dilakukan dengan memisahkan satu atau lebih bahan
dalam suatu campuran baik berupa padatan maupun cairan dengan menggunakan
pelarut yang sesuai (Chadijah, 2014).
Ekstraksi pewarna alami umumnya dilakukan dengan menghancurkan bahan
yang mengandung pigmen zat warna alami dan merendamnya dengan pelarut yang
sesuai atau polaritasnya dalam suatu campuran. Pelarut-pelarut yang bersifat polar
akan mudah melarutkan pigmen antosianin dengan baik karena pigmen antosianin
merupakan seuatu senyawa yang bersifat polar. Pelarut yang sering digunakan dalam
proses ekstraksi untuk mengambil pigmen antosianin pada tumbuhan yaitu etanol,
metanol, isopropanol, aseton dan aquadest. Pelarut tersebut biasanya dikombinasikan
14
dengan asam seperti asam klorida, asam sitrat, asam asetat dan asam organik lainnya
(Hermawati, dkk., 2015: 302).
Metode ekstraksi pelarut seperti maserasi merupakan salah satu cara ekstraksi
yang sederhana yang dilakukan dengan cara merendam bahan dalam pelarut yang
sesuai selama beberapa hari pada temperatur kamar dan terlindungi dari cahaya
(Damayanti dan Endah, 2012: 2). Keuntungan dengan menggunakan metode
maserasi yaitu prosesnya lebih praktis, pelarut yang digunakan lebih sedikit, tidak
memerlukan pemanasan akan tetapi hanya membutuhkan waktu yang relatif lama
(Putra, dkk., 2014: 114). Selain itu, metode maserasi mudah dilakukan sehingga bisa
langsung diaplikasikan dalam industri rumah tangga (Siregar dan Nurlela, 2011:
461).
2. Faktor yang Mempengaruhi Ekstraksi Maserasi
Faktor-faktor yang mempengaruhi suatu ekstraksi yaitu waktu, suhu,
kecepatan pengaduk serta volume pelarut. Oleh karena itu, dapat ditentukan kondisi
yang optimal untuk ekstraksi. Kondisi optimal yang diperoleh dapat digunakan
sebagai dasar untuk mempelajari proses ekstraksi lebih jauh lagi (Yuniwati, dkk.,
2012: 258).
Menurut Aziz, dkk (2009), ada beberapa variabel yang mempengaruhi suatu
proses ekstraksi di antaranya sebagai berikut:
a) Jumlah solvent
b) Suhu ekstraksi
c) Jenis solvent
d) Ukuran partikel solid
e) Waktu ekstraksi
f) Jumlah tahap
15
g) Viskositas pelarut
h) Laju air pelarut
3. Pelarut yang Digunakan
Pemisahan suatu komponen dari suatu bahan yang terdiri dari dua atau lebih
komponen dengan cara melarutkan salah satu komponen dengan pelarut yang sesuai.
Pelarut tersebut dapat berasal dari senyawa organik seperti etanol, metanol,
petroleum eter dam lain-lain (Kwartiningsih, dkk., 2009: 42).
Menurut Kwartiningsih, dkk (2009: 42), faktor-faktor dalam pemilihan
pelarut yaitu sebagai berikut:
a) Selektivitas, yaitu pelarut harus dapat melarutkan semua zat yang akan diekstrak
dengan cepat dan sempurna.
b) Pelarut harus memiliki titik didih yang cukup rendah agar pelarut mudah
diuapkan tanpa menggunakan suhu tinggi.
c) Pelarut harus bersifat inert sehingga tidak bereaksi dengan komponen lain.
d) Pelarut harus mempunyai titik didih seragam, dan jika diuapkan tidak tertinggal
dal/am produk.
e) Harga pelarut yang murah
f) Pelarut harus tahan atau tidak mudah terbakar.
Etanol merupakan senyawa organik yang tersusun dari unsur karbon,
hidrogen dan oksigen. Etanol memiliki titik didih yang lebih tinggi dibandingkan
dengan metanol dan lebih rendah dibandingkan dengan alkohol-alkohol yang
lainnya. Etanol bersifat dapat bercampur dengan air dan dengan kebanyakan larutan
organik baik yang bersifat polar maupun nonpolar. Gugus hidroksi (OH) yang
terdapat pada etanol dapat membantu melarutkan molekul polar dan ion-ion
sedangkan gugus alkilnya (CH3CH2) dapat mengikat molekul nonpolar sehingga
16
etanol dapat melarutkan senyawa polar maupun senyawa nonpolar (Aziz, dkk., 2009:
4).
Proses evaporasi merupakan proses yang melibatkan pindah panas dan pindah
masa secara simultan yang artinya dalam proses ini sebagian air atau pelarut akan
diuapkan sehingga akan diperoleh suatu produk yang kental (konsentrat). Alat yang
digunakan yaitu evaporator (Supriatna, 2008: 3).
D. Pengeringan Beku (Freeze Drying)
Teknologi freeze drying telah dikenal sejak zaman prasejarah yang digunakan
oleh suku Aztec dan Arktik untuk melestarikan bahan makanan. Pada akhir tahun
1880-an, prinsip dasar dari freeze drying mulai dipahami dan mulai digunakan pada
skala laboratorium (Martiansyah dan Riza, 2017: 15).
Pengeringan beku (freeze drying) merupakan salah satu metode pengeringan
yang memiliki keunggulan dalam mempertahankan mutu hasil pengeringan, terutama
untuk produk-produk yang sensitif terhadap panas, contohnya untuk pengeringan
pangan (Siregar, 2004: 4). Alat yang digunakan dalam pengeringan beku ini adalah
freeze drayer dapat dilihat pada gambar 2.2. Freeze drayer merupakan sarana alat
atau mesin untuk mengeringkan bahan dengan pemanasan suhu rendah (Anna, dkk.,
2013: 62).
Gambar 2.7. Freeze Drayer
(Sumber: Anna, dkk., 2013: 63)
17
Prinsip kerja alat ini yaitu dimulai dengan proses pembekuan pada suhu
rendah sekitar -40℃ dan selanjutnya proses pengeringan (sublimasi) dapat dilihat
pada gambar 2.3. Bahan cair akan melalui suatu proses pembekuan melalui suatu
proses pemanasan ringan dalam suatu ruang hampa udara. Kristal es yang terbentuk
selama proses pembekuan, mengalami proses sublimasi yaitu perubahan langsung
dari es menjadi uap air tanpa melewati fase cair. Kemudian akan menghasilkan
produk yang bersifat prorous, tidak merusak bahan atau senyawa yang terkandung
serta aman (Anna, dkk., 2013: 62).
Air Es Ruang Kosong
Produk Segar Produk Beku Produk Kering-Beku
Gambar 2.8. Mekanisme Terjadinya Pengeringan Beku
(Sumber: Haryadi, 2013)
E. Uji Stabilitas
Uji stabilitas merupakan suatu uji yang dilakukan untuk mengetahui
kestabilan suatu pigmen atau zat warna dalam berbagai kondisi lingkungan.
Kestabilan suatu pigmen dapat dipengaruhi oleh beberapa faktor di antaranya yaitu
pemanasan atau pengaruh suhu, perubahan pH dan juga lama penyimpanan
(Fathinatullabibah, dkk., 2014: 60).
Pembekuan Sublimasi
18
Menurut Armanzah dan Tri (2016: 4-5), terdapat beberapa faktor yang dapat
mempengaruhi kestabilan zat warna alami yaitu sebagai berikut:
1. Pengaruh pH
Faktor pH dapat mempengaruhi warna dan juga mempengaruhi stabilitasnya.
Contohnya, senyawa antosianin pada larutan asam bersifat stabil
dibandingkan pada larutan alkali.
2. Pengaruh Suhu
Suhu pemanasan pada makanan tidak dapat kembali atau memiliki sifat yang
irreversibel dalam mempengaruhi stabilitas pigmen zat warna alami.
3. Pengaruh Cahaya
Apabila pigmen zat warna alami terkena cahaya maka akan mempengaruhi
warna pada pigmen tersebut. Cahaya akan membuat warna memudar secara
perlahan.
4. Pengaruh Oksigen
Oksigen akan mempercepat kerusakan pada pigmen zat warna alami.
Fathinatullahbibah (2014: 62-63) dalam penelitiannya menjelaskan bahwa
aktivitas antioksidan pada daun jati dipengaruhi oleh nilai pH dan suhu. Aktivitas
antioksidan akan menurun seiring dengan meningkatnya pH. Hal tersebut terjadi
karena pada pH rendah maka densitas ion hidrogen akan meningkat sehingga
menekan pelepasan ion hidrogen dari senyawa fenolik. Sedangkan untuk pengaruh
suh, dimana apabila dilakukan adanya proses pemanasan dapat menyebabkan
hilangnya warna merah pada senyawa antosianin dan akan meningkatkan warna
coklat sebagai hasil degradasi dan polimerasi pigmen. Hal ini disebabkan karena
pada degradasi warna pada antosianin, oleh perubahan kation flavilium yang
19
berwarna merah menjadi basa karbinol dan akhirnya menjadi karbinol yang tidak
berwarna serta pada akhirnya berakhir pada produk degradasi berwarna coklat.
F. Spektrofotometer UV-Vis
Spektoskopi adalah suatu ilmu yang mempelajari tentang materi dan
komponennya berdasarkan cahaya atau partikel yang dipancarkan, diserap maupun
dipantulkan oleh materi tersebut. Spektroskopi juga dapat dijelaskan sebagai suatu
ilmu yang mempelajari tentang interaksi antara cahaya dan materi. Spektrofotometer
digunakan untuk mengukur jumlah cahaya yang ditransmisikan atau diabsorpsi oleh
molekul-molekul di dalam larutan. Spesi yang mengabsorpsi dapat melakukan
transisi elektron yang menimbulkan spektra ultraviolet dan tampak.
Spektrofotometer UV-Vis merupakan salah satu jenis spektrofotometer yang
sering digunakan dalam kegiatan analisis. Molekul-molekul dapat mengabsorpsi atau
mentransmisi radiasi gelombang elektromagnetik. Berkas cahaya putih adalah
kombinasi semua panjang gelombang spektrum tampak. Perbedaan warna yang
dilihat pada dasarnya ditentukan dengan bagaimana gelombang cahaya tersebut
diserap atau dipantulkan oleh objek atau suatu larutan (Nurlela, 2011: 103).
Spektrofotometer ini memiliki bagian peralatan optik atau bagian-bagian yang
memegang fungsi dan peranannya sendiri.
Alat ini bekerja berdasarkan pada serapan sinar ultraviolet tampak oleh
molekul yang mengabsorbsi cahaya elektromagnetik. Senyawa-senyawa zat warna
dapat diukur panjang gelombang maksimum pada UV-Vis dengan panjang
gelombang 200-700 nm (Harbone, 1987: 21). Hasil serapan UV-Vis dari daun jati
dapat dilihat sebagai berikut:
20
Gambar 2.9. Spektra Karakteristik Daun Jati
(Baharuddin, 2015: 40)
Golongan zat warna memiliki spektrum yang berbeda-beda sehingga panjang
gelombang yang dihasilkan dari golongan zat warna berbeda-beda. Tabel spektrum
dari golongan zat warna tumbuhan dapat dilihat sebagai berikut:
Tabel 2.1. Spektrum Golongan Pigmen Tumbuhan
Golongan Pigmen Jangka Spektrum
Tampak (nm)
Jangka Ultraviolet (nm)
Antosianin 475 - 550 ±270
Tanin 474,5 -
Alkaloid - 270 – 285
21
BAB III
METODOLOGI PENELITIAN
A. Waktu dan Lokasi Penelitian
Penelitian ini telah dilaksanakan pada bulan Mei-September 2018 di
Laboratorium Kimia Analitik, Laboratorium Organik Universitas Islam Negeri
Alauddin Makassar dan Laboratorium Penelitian Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi
Makassar.
B. Alat dan Bahan
1. Alat
Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini yaitu serangkaian
Spekrofotometer UV-Vis Varian Cary 50 cone, freeze drying merk Scanvac, lemari
asap, rotary vacum evaporator, oven, neraca analitik, blender, termometer 1000C,
alat-alat gelas, cawan petri, bulp, pisau, toples, pipet tetes, batang pengaduk, corong
dan botol semprot.
2. Bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu aluminium foil,
aquadest (H2O), asam klorida (HCl) 2 M, asam klorida (HCl) pekat, buffer asam
sitrat (pH 2, 4 dan 6), buffer KCl pH 1, buffer Na-Sitrat, daun jati (Tectona grandis
Linn. F.), etanol (C2H5OH) 96%, kertas saring, natrium asetat, natrium klorida
(NaCl), pereaksi FeCl3, pereaksi Mayer dan pereaksi Wagner.
22
C. Prosedur Kerja
1. Penyiapan Bahan
Sampel yang digunakan yaitu daun jati muda yang diambil di perkebunan jati
yang berada di Desa Pao, Kec. Tarowang, Kab. Jeneponto, Provinsi Sulawesi
Selatan, Indonesia. Daerah ini merupakan daerah yang beriklim tropis sehingga
sangat cocok untuk pertumbuhan tanaman jati sebagai tanaman yang hidup pada
daerah tropis. Daun jati yang diambil adalah daun jati yang masih muda, kemudian
dibersihkan dan dipotong kecil. Setelah itu, dikeringkan pada suhu ruang kemudian
dihaluskan menggunakan blender sampai menjadi serbuk (Fathinatullabibah, dkk.,
2014).
2. Ekstraksi dan Freeze Drying (Arifah dkk, 2016: 19)
Serbuk daun jati ditimbang sebanyak 800 gram kemudian direndam (proses
maserasi) dengan menggunakan etanol 96% yang telah didestilasi selama 92 jam,
dan pelarutnya diganti setiap 24 jam. Selanjutnya filtrat hasil maserasi pertama,
kedua dan ketiga digabungkan kemudian diuapkan dengan rotary vacum evaporator
hingga menghasilkan ekstrak kental, selanjutnya dikeringkan menggunakan
pengering beku (freeze drying) pada suhu -400C hingga menjadi serbuk (Haryadi,
2013: 55).
3. Uji Kualitatif Senyawa Fitokimia (Arifah, dkk., 2016: 19)
Uji fitokimia dilakukan untuk mengetahui jenis metabolit sekunder yang
terkandung pada serbuk etanol daun jati (Tectona grandis Linn. F.) masing-masing
dilarutkan sesuai dengan pelarutnya.
23
a. Uji Antosianin (Neliyanti dan Nora, 2014)
Serbuk sebanyak 0,5 gram dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan
ditambahkan HCl 2 M sebanyak 3 tetes kemudian dipanaskan pada suhu 78℃ selama
5 menit. Adanya antosianin pada sampel ditunjukkan dengan timbulnya warna
merah. Selanjutnya ditambahkan NaOH 2 M tetes demi tetes sambil diamati
perubahan yang terjadi. Adanya antosianin pada sampel ditunjukkan dengan
timbulnya warna hijau biru yang memudar secara perlahan.
b. Uji Alkaloid
Uji alkaloid dilakukan dengan pereaksi Mayer dan pereaksi Wagner. Serbuk
sebanyak 0,5 gram dimasukkan ke dalam gelas kimia dan ditambahkan dengan 3 mL
HCl 2 M sebanyak 5 mL kemudian diaduk dan didinginkan pada suhu ruang.
Selanjutnya, ditambahkan dengan NaCl sebanyak 0,3 g diaduk dan disaring.
Selanjutnya filtrat ditambahkan HCl 2 M sebanyak 2 tetes dan dipisahkan menjadi
dua bagian A dan B. Bagian A diuji dengan pereaksi Mayer dan bagian B diuji
dengan pereaksi Wagner. Apabila terbentuk endapan putih dan coklat maka positif
mengandung alkaloid.
c. Uji Tanin (Arifah, dkk., 2016: 19).
Uji tanin dilakukan dengan serbuk ke dalam plat tetes ditambahkan 3 tetes
FeCl3 1%, apabila terjadi perubahan warna menjadi hijau atau biru kehitaman maka
positif mengandung tanin.
d. Uji Saponin
Uji saponin dilakukan dengan melarutkan serbuk sebanyak 0,5 gram
dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan dengan 10 mL aquades panas.
Kemudian dikocok selama 30 detik. Adanya saponin pada sampel ditunjukkan
dengan terjadinya busa yang bertahan selama 30 menit.
24
4. Uji Kuantitatif Kadar Antosianin (Hayati, dkk., 2012: 138-147)
Disiapkan 2 sampel larutan yaitu larutan pertama untuk larutan pH 1,0
menggunakan buffer KCl dan larutan kedua untuk pH 4,5 menggunakan buffer
Na-Asetat. Selanjutnya, diambil masing-masing 1 mL dan diencerkan menggunakan
larutan buffer masing-masing sampai volume 10 mL (faktor pengenceran = 10).
Sampel hasil pengenceran dilakukan pengukuran absorbansi pada panjang
gelombang 500-700 nm dan 700 nm. Untuk menentukan nilai absorbansinya
menggunakan persamaan (1) berikut:
A = (Amax – A700)pH 1,0 – (Amax – A700)pH 4,5 ...................................................(1)
dan untuk menentukan kandungan pigmen antosianin pada sampel dihitung dengan
persamaan (2) berikut:
MAP (mg/L) = Absorbansi x MW x DF x 1000
ε x l......................................................(2)
Keterangan:
A = Absorbansi larutan
MW = Moleculer weight (berat molekul) (449,2 )
𝜀 = Absortivitas molar cyanidin-3-glucoside (26.900)
DF = Dilution factor (faktor pengenceran)
b = tebal kuvet (1)
MAP = Monomeric Anthocyanin Pigment
5. Analisis Kadar Air dan Kadar Abu (AOAC, 2005)
a. Kadar Air
Serbuk ditimbang sebanyak 2 gram dalam cawan yang telah dikeringkan
dalam oven selama 1 jam dan ditimbang untuk diketahui bobotnya. Cawan yang
berisi sampel tersebut kemudian dikeringkan dalam oven pada suhu 105℃ selama 3
jam. Selanjutnya, cawan tersebut dikeluarkan dan didinginkan dalam desikator
25
kemudian ditimbang. Pengeringan dilanjutkan sampai diperoleh bobot kosongnya.
Kadar air dihitung dalam persamaan berikut:
Kadar air = Bobot Awal−Bobot Konstan
Bobot Awal x 100%
b. Kadar Abu
Serbuk ditimbang sebanyak 2 gram dalam cawan yang telah dikeringkan
dalam oven selama 1 jam dan ditimbang untuk diketahui bobotnya. Cawan tersebut
kemudian dipijarkan dan diabukan dalam tanur pada suhu 600℃ selama 4 jam.
Selanjutnya, cawan tersebut dikeluarkan dan didinginkan dalam desikator, kemudian
ditimbang. Pengabuan dilanjutkan sampai diperoleh bobot kosongnya. Kadar abu
dihitung dalam persamaan:
Kadar abu = ((Bobot Cawan+Abu)− Bobot Kosong)
Bobot Sampel
6. Uji Stabilitas (Fauziah, 2016: 24)
a. Pengaruh Suhu
Serbuk dilarutkan sebanyak 0,5 gram dalam 50 mL aquades. Larutan
dipanaskan dengan variasi suhu (40, 60, 80)0C selama 1 jam. Kemudian diukur
absorbansinya pada panjang gelombang maksimum.
b. Pengaruh pH
Serbuk dibuat dalam 3 tingkat keasaman (pH 2, 4, 6). Rentetan serbuk
sebanyak 0,5 gram dilarutkan dalam 50 mL buffer asam sitrat sesuai variasi pH.
Kemudian diukur absorbansinya pada panjang gelombang maksimum.
26
c. Pengaruh Lama Penyimpanan
Serbuk disimpan pada suhu kamar dengan variasi lama penyimpanan (1, 3, 5)
hari. Kemudian dilakukan pengenceran yaitu serbuk dilarutkan sebanyak 0,5 gram
dalam 50 mL aquades. Kemudian diukur absorbansinya pada panjang gelombang
maksimum.
7. Uji Organoleptik (Mahfud, : 29)
Uji organoleptik dilakukan terhadap 25 orang panelis menggunakan uji
hedonik untuk mengetahui daya terima konsumen terhadap pemanfaatan pewarna
alami daun jati dalam produk minuman dengan penambahan pewarna alami sebesar 1
gram, 2 gram dan 3 gram dari setiap 200 mL air yang ditambahkan gula pasir 1½
sendok teh dan sirup 3 sendok teh. Beberapa aspek organoleptik yang diamati adalah
warna, aroma dan rasa.
27
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Hasil Penelitian
1. Preparasi Sampel
Sampel yang digunakan yaitu daun jati muda yang diambil di perkebunan jati
yang berada di Desa Pao, Kec. Tarowang, Kab. Jeneponto, Provinsi Sulawesi
Selatan, Indonesia. Daun dibersihkan, dikeringkan dan kemudian dihaluskan menjadi
serbuk.
2. Ekstraksi dan Freeze Drying
Ekstraksi daun Jati (Tectona grandis Linn. F.) dilakukan dengan cara
maserasi. Ekstrak yang dihasilkan dari proses maserasi dengan pelarut etanol sebesar
350 mL dan dipekatkan dengan rotary vacum evaporator kemudian dilakukan
pengeringan. Dapat dilihat pada tabel 4.1 berikut:
Tabel 4.1. Hasil Ekstraksi Serbuk Daun Jati (Tectona grandis Linn. F.)
No. Sampel Bobot/Volume
1. Serbuk Daun Jati 800 g
2. Ekstrak kental etanol 350 mL
3. Bubuk ekstrak 144,75 g
3. Uji Kualitatif Senyawa Fitokimia
Uji senyawa fitokimia (skrining fitokimia) merupakan uji pendahuluan yang
dilakukan untuk mengidentifikasi kandungan senyawa aktif yang terdapat di dalam
sampel. Hasil uji fitokimia dapat dilihat pada tabel 4.2.
28
Tabel 4.2. Hasil Uji Fitokimia
Senyawa Pereaksi Hasil Keterangan
Antosianin HCl + Merah
NaOH + Hijau Kebiruan
Alkaloid Wagner + Jingga kecoklatan
Mayer - Kuning
Tanin FeCl3 + Hijau Kehitaman
Saponin Aquadest Panas + Berbusa
4. Uji Kuantitatif Kadar Antosianin
Uji secara kuantitatif dilakukan dengan metode differential pH untuk
menentukan kadar total antosianin yang terdapat dalam sampel. pH yang digunakan
adalah buffer pH 1 dan buffer pH 4,5 dengan menggunakan spektrofotometer
UV-Vis pada panjang gelombang maksimum dan panjang gelombang 700 nm. Hasil
yang diperoleh dari uji kuantitatif dapat dilihat pada tabel 4.3.
29
Tabel 4.3. Hasil Uji Kadar Total Antosianin
Perlakuan Total Antosianin (mg/L) Rata-Rata (mg/L)
Simplo 3,674
3,34
Duplo 3,006
5. Analisis Kadar Air dan Kadar Abu
a. Kadar Air
Analisis kadar air dilakukan dengan metode gravimetri berdasarkan
penguapan air yang ada dalam sampel dengan jalan pemanasan atau pengeringan
dengan oven. Kadar air pada sampel serbuk ekstrak etanol daun jati menentukan
kualitasnya. Hasil yang diperoleh pada pengujian kadar air dapat dilihat pada tabel
4.4 berikut:
Tabel 4.4. Hasil Uji Kadar Air
Perlakuan Kadar Air (%) Rata-Rata (%)
Simplo 9,8 9,35
Duplo 8,9
b. Kadar Abu
Analisis kadar abu dilakukan untuk menentukan kadar mineral dalam suatu
bahan dengan proses pembakaran pada suhu 600℃. Hasil yang diperoleh pada
pengujian kadar dapat dilihat pada tabel 4.5 berikut:
30
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
500 550 600 650 700
Ab
sorb
an
si
Panjang gelombang (nm)
Suhu 40°C
suhu 60°C
suhu 80°C
Tabel 4.5. Hasil Uji Kadar Abu
Perlakuan Kadar Abu (%) Rata-Rata (%)
Simplo 4,34 4,245
Duplo 4,15
6. Uji Stabilitas
a. Pengaruh Suhu
Stabilitas pigmen zat warna alami dapat dipengaruhi oleh suhu lingkungan
misalnya proses pemanasan. Hasil pengamatan stabilitas pigmen zat warna terhadap
pengaruh suhu antara 40℃, 60℃ dan 80℃ selama 1 jam dengan absorbansi pada
panjang gelombang 500-700 nm. Hasil yang diperoleh dapat dilihat pada gambar 4.1.
Gambar 4.1. Grafik Pengaruh Suhu Terhadap Absorbansi Zat Warna dari Ekstrak
Etanol Daun Jati (Tectona grandis Linn. F.)
b. Pengaruh pH
Stabilitas pigmen zat warna alami dapat dipengaruhi oleh pH. Semakin asam
maka penyerapan warnanya semakin tinggi. Hasil pengamatan stabilitas zat warna
31
terhadap pengaruh pH antara pH 2, 4 dan 6 dengan absorbansi pada panjang
gelombang 500-700 nm. Hasil yang diperoleh dapat dilihat pada gambar 4.2.
Gambar 4.2. Grafik Pengaruh pH Terhadap Absorbansi Zat Warna dari Ekstrak
Etanol Daun Jati (Tectona grandis Linn. F.)
c. Pengaruh Lama Penyimpanan
Stabilitas zat warna alami dapat dipengaruhi oleh lama penyimpanan.
Semakin lama maka penyarapan warnanya semakin menurun. Hasil pengamatan
stabilitas zat warna terhadap pengaruh lama penyimpanan dengan absorbansi pada
panjang gelombang 500-700 nm. Hasil yang diperoleh dapat dilihat pada gambar 4.3.
Gambar 4.3. Grafik Pengaruh Lama Penyimpanan Terhadap Absorbansi Zat Warna dari Ekstrak
Etanol Daun Jati (Tectona grandis Linn. F.)
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
0,8
0,9
500 550 600 650 700
Ab
sorb
an
si
Panjang gelombang (nm)
2 hari
5 hari
8 hari
0,02
0,04
0,06
0,08
0,1
0,12
0,14
0,16
500 550 600 650 700
Ab
sorb
an
si
Panjang gelombang (nm)
pH 2
pH 4
pH 6
32
7. Uji Organoleptik (Mahfud, : 29)
Uji organoleptik dilakukan terhadap 25 orang panelis menggunakan uji
hedonik untuk mengetahui daya terima konsumen terhadap pemanfaatan pewarna
alami daun jati dalam produk minuman. Hasil yang diperoleh dapat dilihat pada
gambar 4.4 berikut:
Gambar 4.4. Grafik Nilai Rata-Rata Kesukaan terhadap Warna, Aroma dan Rasa
B. Pembahasan
1. Preparasi Sampel
Sampel yang digunakan yaitu daun jati muda yang diambil di perkebunan jati
yang berada di Desa Pao, Kec. Tarowang, Kab. Jeneponto, Provinsi Sulawesi
Selatan, Indonesia. Daerah ini merupakan daerah yang beriklim tropis sehingga
sangat cocok untuk pertumbuhan tanaman jati sebagai tanaman yang hidup pada
daerah tropis. Daun jati dipilih karena memiliki potensi sebagai zat warna alami.
Daun jati muda yang digunakan perlu disortasi terlebih dahulu untuk
memisahkan dari pengotor-pengotor. Daun jati muda yang telah diambil dari
pohonnya terlebih dahulu dicuci, kemudian dikeringkan pada suhu ruang tanpa
1
2
3
4
5
6
7
8
1 2 3
warna aroma rasa
33
terkena oleh cahaya matahari secara langsung karena akan merusak metabolit
sekunder yang terkandung pada daun jati. Selanjutnya sampel dipotong kecil-kecil
dan dihaluskan menggunakan blender sehingga menjadi serbuk untuk mempermudah
penarikan zat-zat aktif pada saat perendaman (maserasi). Serbuk yang diperoleh
disimpan pada wadah yang kering, besih dan terhindar dari cahaya matahari untuk
mencegah kerusakan.
2. Ekstraksi dan Freeze Drying
Daun jati yang telah dihaluskan sebanyak 800 gram dimaserasi dengan
pelarut etanol 96% yang telah dimurnikan secukupnya. Proses maserasi dipilih
karena sampel yang digunakan tidak tahan panas dan prosesnya sangat sederhana.
Proses maserasi terjadi dengan mekanisme pelarut akan masuk ke dalam sel tanaman
melewati dinding sel sehingga senyawa aktif yang berada di dalam sel akan larut
karena adanya perbedaan konsentrasi di dalam sel dan di luar sel. Larutan yang
konsentrasinya tinggi akan terdesak keluar dan akan diganti dengan pelarut yang
konsentrasinya rendah. Proses tersebut akan berulang sampai terjadi keseimbangan
antara larutan di dalam sel dan larutan di luar sel. Kelebihan dari proses maserasi
adalah peralatan yang digunakan sederhana dan tanpa pemanasan.
Proses maserasi dilakukan selama 92 jam dimana setiap 24 jam pelarutnya
diganti. Semakin lama proses maserasi maka semakin banyak hasil yang diperoleh
sampai titik jenuh larutan. Pelarut yang digunakan pada penelitian ini adalah etanol
96% yang telah dimurnikan. Etanol dipilih karena mudah didapat serta merupakan
pelarut polar yang dapat melarutkan senyawa aktif atau senyawa metabolit sekunder
yang terdapat di dalam daun jati. Hasil yang diperoleh dari proses maserasi adalah
maserat sebanyak 350 mL. Maserat tersebut kemudian diuapkan dengan rotary
vacum evaporator hingga didapatkan ekstrak kental. Penguapan pelarut etanol
34
dilakukan di bawah titik didihnya tanpa merusak senyawa aktif yang terkandung di
dalam sampel. Hasil yang diperoleh yaitu ekstrak kental berwarna hitam kemerahan.
Selanjutnya ekstrak kental tersebut dikeringkan menggunakan pengering beku
(freeze drying). Pengeringan ini dilakukan untuk mempertahankan mutu pengeringan
dari sampel. Hasil yang diperoleh dari freeze drying sebanyak 144,75 gram.
3. Uji Kualitatif Senyawa Fitokimia
Uji fitokimia atau skrining fitokimia dilakukan untuk mengetahui kandungan
senyawa aktif yang terdapat pada sampel daun jati (Tectona grandis Linn. F.).
Berdasarkan Tabel 4.2, ekstrak etanol daun jati positif mengandung senyawa
metabolit sekunder golongan antosianin, alkaloid, tanin dan saponin. Etanol
merupakan pelarut polar sehingga senyawa yang terekstrak merupakan senyawa
polar. Kandungan senyawa metabolit sekunder tersebut sesuai dengan hasil
penelitian yang dilakukan oleh Januarti, dkk., tahun 2014, dalam penelitiannya
melaporkan bahwa ekstrak etanol daun jati mengandung senyawa flavonoid,
alkaloid, tanin dan saponin pada simplisia.
Uji senyawa flavonoid seperti antosianin dilakukan dengan menggunakan
HCl yang apabila dipanaskan akan membentuk warna merah. Sedangkan warna
hijau biru yang terbentuk apabila diberi penambahan NaOH (Harborne, 1987).
Kandungan senyawa antosianin telah dilaporkan oleh (Fauziah, dkk, 2016) melalui
uji fitokimia. Reaksi yang terjadi dapat dilihat pada gambar 4.5 dan gambar 4.6
berikut:
35
+ HCl → + Cl-
Gambar 4.5. Reaksi Antosianin dengan Asam Klorida
+ NaOH → + OH-
Gambar 4.6. Reaksi Antosianin dengan Natrium Hidroksida
Uji alkaloid dengan uji wagner positif menghasilkan warna jingga
kecoklatan. Kandungan senyawa alkaloid pada ekstrak etanol daun jati telah
dilaporkan oleh (Ashvin, 2014) melalui uji fitokimia yang memiliki hasil positif
pada uji wagner. Selain itu, pada penelitian Afiyah, 2013 melaporkan bahwa ekstrak
daun jati dengan pelarut etanol yang teridentifikasi pada uji fiitokimia adalah
mengandung senyawa alkaloid. Hasil positif pada uji Wagner yaitu ditandai dengan
terbentuknya endapan cokelat muda sampai oranye yang berasal dari
kalium-alkaloid. Pada pembuatan pereaksi Wagner, iodin bereaksi dengan ion I- dari
kalium iodida menghasilkan ion I3- yang berwarna cokelat. Pada uji Wagner, ion
logam K+ akan membentuk ikatan kovalen kordinat dengan nitrogen pada alkaloid
membentuk kompleks kalium-alkaloid yang mengendap. Reaksi yang terjadi pada
uji Wagner dapat dilihat pada gambar 4.7 berikut:
36
K+
Kalium-Alkaloid (Endapan)
Gambar 4.7. Reaksi Alkaloid dengan Pereaksi Wagner
(Setyowati, 2014: 275)
Uji senyawa tanin dilakukan dengan menggunakan pereaksi FeCl3 1%. Hasil
yang diperoleh pada ekstrak daun jati yaitu positif mengandung senyawa tanin yang
menghasilkan warna hijau kehitaman. Hal itu terjadi karena tanin akan bereaksi
dengan ion Fe3+ membentuk senyawa kompleks (Setyowati, dkk., 2014: 276).
Reaksi yang terjadi dapat dilihat pada gambar 4.8 berikut:
Gambar 4.8. Reaksi Tanin dengan FeCl3
(Setyowati, 2014: 275)
37
Uji senyawa saponin dilakukan dengan menggunakan aquadest panas dengan
cara dilarutkan. Hasil yang diperoleh pada ekstrak daun jati yaitu positif
mengandung senyawa saponin yang akan menimbulkan busa setelah pengocokan.
Busa yang terbentuk disebabkan karena adanya glikosida yang akan membentuk
busa dalam air dan akan terhidrolisis menjadi glukosa dan senyawa lainnya
(Agustina, dkk., 2017: 119). Reaksi yang terjadi dapat dilihat pada gambar 4.9
berikut:
Gambar 4.9. Reaksi Saponin dalam Air
(Setyowati, 2014: 277)
4. Uji Kuantitatif Kadar Antosianin
Uji kuantitatif kadar antosianin dilakukan dengan metode differential pH
yaitu pH 1 dan pH 4,5 dan diukur absorbansinya dengan spektrofotometer UV-Vis
pada panjang gelombang 500-700 nm dan panjang gelombang 700 nm. Hasil yang
diperoleh yaitu kadar total antosianin ekstrak etanol daun jati yaitu 3,34 mg/L. Hal
ini sesuai dengan penelitian yang dilakukan oleh Armansyah dan Tri, 2016, yang
melaporkan bahwa kadar total antosianin pada ekstrak etanol ubi jalar dengan
metode pH differential sebesar 5,92 mg/L.
38
5. Analisis Kadar Air dan Kadar Abu
Analisis kadar air dilakukan untuk mengetahui kandungan air yang terdapat
pada ekstrak daun jati dengan cara pengeringan. Kadar air menunjukkan banyaknya
air yang terkandung di dalam bahan pangan. Prinsip dari kadar air yaitu menguapkan
air yang ada pada sampel dengan cara pemanasan pada suhu 105℃ sampai didapat
nilai konstan yang tidak lebih dari 0,0005. Kadar air sangat berperan dalam daya
awet bahan pangan. Semakin tinggi kadar air maka semakin semakin rendah daya
awet pada bahan pangan. Herman, dkk., 2011: 112, dalam penelitiannya melaporkan
bahwa kadar air dalam bahan pangan ikut menentukan kesegaran dan daya awet
bahan pangan tersebut, kadar air yang tinggi mengakibatkan mudahnya bakteri,
kapang dan khamir untuk berkembang biak sehingga akan terjadi perubahan pada
bahan pangan. Berdasarkan tabel 4.4, hasil yang diperoleh pada analisis kadar air
yang terdapat pada ekstrak etanol daun jati yaitu 9,35%. menurut FHI 2000, umunya
kandungan kadar air yang dipersyaratkan kurang dari 10%, sehingga kadar air
ekstrak etanol daun jati memenuhi standar mutu (Najib, dkk., 2016: 244).
Analisis kadar abu dilakukan untuk mengetahui jumlah mineral yang
terkandung dalam ekstrak daun jati. Prinsip kerja penentuan kadar abu diawali
dengan cara membakar bahan pangan pada tungku pengabuan pada suhu 600℃.
Kemudian ditentukan dengan menimbang sisa mineral hasil pembakaran bahan
organik yang tertinggal sebagai abu. Berdasarkan tabel 4.5, hasil yang diperoleh pada
penentuan kadar abu ekstrak daun jati yaitu 4,245%. Rivai, dkk., 2013: 3,
melaporkan bahwa kadar abu total simplisia daun jati sebesar 6,6795%, memenuhi
nilai standarisasi yang terdapat dalam Farmakope Herbal Indonesia Edisi I (2008)
dimana nilai kadar abu total tidak lebih dari 7,2%.
39
6. Uji Stabilitas
Stabilitas zat warna dari ekstrak etanol daun jati dipengaruhi oleh suhu, pH
dan lama penyimpanan. Hal ini sesuai pada penelitian yang dilakukan oleh Fauziah,
dkk., 2016, dalam penelitiannya melaporkan bahwa stabilitas zat warna alami
dipengaruhi oleh pH, suhu dan lama penyimpanan.
Suhu memiliki peranan dan pengaruh terhadap kestabilan antosianin. Hasil
yang diperoleh yaitu semakin tinggi suhu pemanasan maka kestabilan warna akan
semakin menurun. Menurut Hayati, dkk., 2012 bahwa suhu pengolahan yang tinggi
akan menyebabkan degradasi antosianin. Hal ini disebabkan karena terjadi kerusakan
gugus kromofor pigmen yang menyebabkan kerusakan warna. Suhu yang tinggi
dapat menurunkan stabilitas warna karena terjadinya dekomposisi antosianin dari
bentuk aglikon menjadi kalkon yang tidak berwarna (Hidayah, 2013: 31). Selain itu,
Hayati, dkk, 2012 pada penelitiannya melaporkan bahwa semakin meningkatnya
suhu pemanasan dapat menyebabkan hilangnya glikosil pada antosianin dengan
hidrolisis ikatan glikosidik. Aglikon yang dihasilkan kurang stabil dan menyebabkan
hilangnya warna pada antosianin. Berdasarkan gambar 4.1, menunjukkan terjadinya
penurunan absorbansi pada kenaikan suhu. Suhu pemanasan yang lebih stabil adalah
pemanasan pada suhu 40℃ dibandingkan dengan suhu 60℃ dan suhu 80℃.
pH memiliki peranan dan pengaruh terhadap kestabilan suatu zat warna.
Pada pH yang berbeda memperlihatkan penurunan absorbansi dengan meningkatnya
nilai pH. Hasil yang diperoleh yaitu untuk warna yang dihasilkan pada pH 2 lebih
stabil dibandingkan dengan pH 4 dan pH 6. Hal ini sesuai pada penelitian yang
dilakukan oleh Francis (1982) yang menyatakan bahwa semakin rendah nilai pH (pH
mendekati 1) maka warna konsentrat semakin merah dan lebih stabil. Berdasarkan
gambar 4.2, menunjukkan terjadinya penurunan absorbansi pada kenaikan pH (pH
40
mendekati 7). Perubahan kestabilan dan warna pada antosianin dalam tingkatan pH
tertentu disebabkan oleh sifat antosianin yang memiliki tingkat kestabilan yang
berbeda. Pada pH 1,0 antosianin lebih stabil dan memiliki warna yang lebih merah
dibandingkan dengan pH 4,5 yang kurang stabil dan hampir tidak berwarna. Adapun
reaksi yang terjadi dapat dilihat pada gambar 4.10 berikut:
Basa kuinoidal : biru Kation flavilium (bentuk oxonium):
pH = 7 Oranye ke ungu pH = 1
Kalkon : tidak berwarna Karbinol pseudobasa (bentuk hemiketal)
pH = 4,5 Tidak berwarna. pH 4,5
Gambar 4.10. Reaksi Perubahan Struktur Antosianin pada Kondisi pH yang Berbeda
Lama penyimpanan memiliki peranan dan pengaruh terhadap kestabilan
antosianin. Semakin lama penyimpanan maka semakin menurun kestabilan
antosianin. Berdasarkan gambar 4.3, menunjukkan hasil uji stabilitas zat warna dari
ekstrak etanol daun jati yang mengalami penurunan absorbansi pada kenaikan lama
41
penyimpanan. Tingkat kestabilan yang paling tinggi yaitu penyimpanan hari kedua
dibandingkan dengan hari ke lima dan hari ke delapan. Hal ini sesuai dengan
penelitian yang dilakukan oleh Fauziah, dkk., 2016: 26, bahwa semakin lama
penyimpanan sampel akan menurunkan kestabilan zat warna yang ditandai dengan
terjadinya penurunan serapan.
7. Uji Organoleptik
Uji organoleptik atau uji indra merupakan cara pengujian dengan
menggunakan indra manusia sebagai alat utama untuk pengukuran daya penerimaan
terhadap produk. Pada penilaian ini dilakukan penilaian terhadap warna, aroma dan
rasa terhadap minuman dengan tiga perlakuan yang berbeda yaitu dengan
penambahan zat warna daun jati sebesar 1 gram, 2 gram dan tiga gram.
Berdasarkan gambar 4.7, menunjukkan bahwa dari aspek warna, produk
minuman yang dilakukan pemberian konsentrasi pewarna alami sebanyak 1 gram
memiliki nilai modus 7 artinya panelis menilai suka. Untuk produk minuman yang
dilakukan pemberian konsentrasi pewarna alami sebanyak 2 gram memiliki nilai
modus 5 artinya panelis menilai biasa. Sedangkan, untuk produk minuman yang
dilakukan pemberian konsentrasi pewarna alami sebanyak 3 gram memiliki nilai
modus 3 artinya panelis menilai tidak suka. Berdasarkan data dari jumlah panelis
sebanyak 25 warna yang disukai yaitu pada produk minuman yang dilakukan
pemberian pewarna alami sebesar 1 gram dalam 200 mL air. Berdasarkan hasil
analisis ANOVA yaitu FHitung ≥ FTabel yang mana FHitung yang diperoleh sebesar
22,56093 dan FTabel sebesar 3,12. Oleh karena itu, sesuai dengan hipotesis, H0 ditolak
artinya ada pengaruh penambahan pewarna alami daun jati terhadap warna produk
minuman.
42
Dari aspek aroma, produk minuman yang dilakukan pemberian konsentrasi
pewarna alami sebanyak 1 gram memiliki nilai modus 7 artinya panelis menilai suka.
Untuk produk minuman yang dilakukan pemberian konsentrasi pewarna alami
sebanyak 2 gram memiliki nilai modus 7 artinya panelis menilai suka. Sedangkan,
untuk produk minuman yang dilakukan pemberian konsentrasi pewarna alami
sebanyak 3 gram memiliki nilai modus 5 artinya panelis menilai biasa. Berdasarkan
data dari jumlah panelis sebanyak 25 warna yang disukai yaitu pada produk
minuman yang dilakukan pemberian pewarna alami sebesar 1 dan 2 gram dalam 200
mL air. Berdasarkan hasil analisis ANOVA yaitu FHitung ≥ FTabel yang mana FHitung
yang diperoleh sebesar 13,75439 dan FTabel sebesar 3,12. Oleh karena itu, sesuai
dengan hipotesis, H0 ditolak artinya ada pengaruh penambahan pewarna alami daun
jati terhadap aroma produk minuman.
Dari aspek rasa, produk minuman yang dilakukan pemberian konsentrasi
pewarna alami sebanyak 1 gram memiliki nilai modus 7 artinya panelis menilai suka.
Untuk produk minuman yang dilakukan pemberian konsentrasi pewarna alami
sebanyak 2 gram memiliki nilai modus 7 artinya panelis menilai suka. Sedangkan,
untuk produk minuman yang dilakukan pemberian konsentrasi pewarna alami
sebanyak 3 gram memiliki nilai modus 3 artinya panelis menilai tidak suka.
Berdasarkan data dari jumlah panelis sebanyak 25 warna yang disukai yaitu pada
produk minuman yang dilakukan pemberian pewarna alami sebesar 1 gram dan 2
gram dalam 200 mL air. Berdasarkan hasil analisis ANOVA yaitu FHitung ≥ FTabel
yang mana FHitung yang diperoleh sebesar 22,1483 dan FTabel sebesar 3,12. Oleh
karena itu, sesuai dengan hipotesis, H0 ditolak artinya ada pengaruh penambahan
pewarna alami daun jati terhadap rasa produk minuman.
43
Hasil dari uji organoleptik menunjukkan bahwa bubuk zat pewarna alami
dari ekstrak etanol daun jati layak dijadikan sebagai pewarna alami pada produk
minuman dengan tingkat warna disukai pada pemberian konsentrasi 1 gram
sedangkan untuk tingkat aroma dan rasa yang disukai pada pemberian konsentrasi 1
dan 2 gram dalam 200 mL air.
44
BAB V
PENUTUP
A. Kesimpulan
Kesimpulan pada penelitian ini yaitu sebagai berikut:
1. Hasil identifikasi menunjukkan bahwa daun jati mengandung antosianin dan
tanin.
2. Zat warna alami stabil pada suhu 400C, pH 2 dan penyimpanan selama 2 hari.
3. Uji organoleptik menunjukkan bahwa warna yang disukai pada konsentrasi
0,002 g/mL air serta aroma dan rasa yang disukai pada konsentrasi 0,002
g/mL dan 0,001 g/mL air.
B. Saran
Adapun saran yang dapat diberikan sebaiknya perlu dilakukan penelitian
lebih lanjut tentang uji stabilitas sifat fisik, sifat kimia dan mikrobiologi dari serbuk
ekstrak etanol daun jati tersebut.
45
DAFTAR PUSTAKA
Al-Quranul Karim.
Aberoumand, Ali. “A Review Article on Edible Pigments Properties and Sources as Natural Biocolorants in Foodstuff and Food Industry”. World Journal of Dairy and Food Sciences vol.6, no.1 (2011: h.71-78.
Abfidah, Risqiani. “Ekstraksi dan Uji Stabilitas Antosianin Daun Jati (Tectona grandis Linn. F.)”. Skripsi, Pekan Baru Riau: Fakultas Tarbiyah dan Keguruan, 2014.
Agustina, dkk. “Skrining Fitokimia dan Aktivitas Antioksidan Beberapa Fraksi dari Kulit Batang Jarak (Ricinus communis L.)”. Jurnal Pendidikan dan Ilmu Kimia vol.1, no.2 (2017): h. 117-122.
Armanzah, Tri Yuni Hendrawati. “Pengaruh Waktu Maserasi Zat Antosianin sebagai Pewarna Alami dari Ubi Jalar Ungu (Ipomoea batatas L. Poir)”. Jurnal Semnastek vol.1, no.1 (2016): h.1-10.
Anna, dkk. “Uji Fungsi Freeze Dryer Radiofarmaka”. Prosiding Seminar, ISSN 1410-8178 (2013): h. 61-67.
Arifah, dkk. “Uji Fitokimia dan Uji Stabilitas Zat Warna dari Ekstrak Biji Buah Alpukat (Persea americana Mill) dengan Metode Spektroskopi UV-Vis”. Jurnal Atomik vol.1, no.1 (2016): h.18-22.
Aziz, dkk. “Pengaruh Pelarut Heksana dan Etanol, Volume Pelarut dan Waktu Ekstraksi terhadap Hasil Ekstraksi Minyak Kopi”. Jurnal Teknik Kimia vol.16, no.1 (2009): h.1-8.
Baharuddin, dkk. “Karakterisasi Zat Warna Daun Jati (Tectona gramdis) Fraksi Metanol:n-Heksan sebagai Photosensitizer pada Dye Sentized Solar Cell”. Journal of Chemica et Natura Acta vol.3. no.1 (2015): h.37-41.
Chadijah, Sitti. “Pemisahan Kimia”. Makassar: UIN Press, 2014.
Fathinatullabibah, dkk. “Stabilitas Antosianin Ekstrak Daun Jati (Tectona gramdis) terhadap Perlakuan pH dan Suhu”. Jurnal Aplikasi Teknologi Pangan vol.3, no.2 (2014): h.60-63
Fauziah, dkk. “Ekstraksi dan Uji Stabilitas Zat Warna dari Kulit Buah Alpukat (Persea americana Mill) dengan Metode Spektroskopi UV-Vis”. Jurnal Atomik vol.1, no.1 (2016): h. 23-27.
Giusti and Ronald E. Wrolstad. “Characteristic and Measurement of Anthocyanins by UV-Visible Spectroscopy, Current Protocols in Food Analytical Chemistry”. John Wiley and Sons, Inc., F1.2.1-F1.2.13, 2001.
Hayati, dkk. “Konsentrasi Total Senyawa Antosianin Ekstrak Kelopak Bunga Rosella (Hibiscus sabdariffa L.) Pengaruh Temperatur dan pH”. Jurnal Kimia vol.6, no.2 (2012): h.138-147.
45
46
Herman, dkk. “Analisis Kadar Mineral dalam Abu Buah Nipa (Nypa fructicans)
Kaliwanggu Teluk Kendari Sulawesi Tenggara”. Jurnal Trop Pharms Chem vol.1,
no.2 (2011): h. 107-113.
Hermawati, dkk. “Pengaruh Konsentrasi Asam Sitrat terhadap Karakteristik Ekstrak Antosianin Daun Jati serta Uji Stabilitasnya dalam Es Krim”. Jurnal Kimia vol.1, no.1 (2015): h.301-308.
Hidayah, Tri. “Uji Stabilitas Pigmen dan Antosianin Hasil Ekstraksi Zat Warna Alami dari Kulit Buah Naga (Hylocereus undatus)”. Skripsi Semarang, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan, 2013.
Januarti, dkk. “Ekstraksi Senyawa Flavonoid Daun Jati (Tectona grandis L.) dengan Metode Ultrasonik (Kajian Rasio Bahan: Pelarut dan Lama Ekstraksi)”. Media Farmasi Indonesia vol.12, no.2 (2017): h. 1259-1266.
Juniarka, dkk. “Analisis Aktivitas Antioksidan dan Kandungan Antosianin Total Ekstrak dan Liposom Kelopak Bunga Rosella (Hibiscus sabdariffa L.)”. Majalah Obat Tradisional vol.16, no.3 (2011): h.115-123.
Kembaren, dkk. “Ekstraksi dan Karakterisasi Serbuk Nano Pigmen dari Daun Tanaman Jati (Tectona grandis Linn. F)”. Jurnal Kimia Kemasan vol.36, no.1 (2014): h.191-196.
Kristiana, dkk. “Ekstraksi Pigmen Antosianin Buah Senggani (Melastoma malabathricum Auct. non Linn) dengan Variasi Jenis Pelarut”. Jurnal Teknosains Pangan vol.1, no.1 (2012): h.105-109.
Kristianto Aries, “Pengaruh Ekstrak Tanin dari Daun Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L.) pada Pengolahan Air”. Skripsi, Jember: Fakultas MIPA Universitas Jember (2013): h.1-65.
Kwartiningsih, dkk. “Zat Pewarna Alami Tekstil dari Kulit Buah Manggis”. Jurnal Ekuilibrium vol. 8, no.1 (2009): h.41-47.
Mariansyah dan Riza. “Pemanfaatan Teknologi Liofilisasi (Freeze Drying) dalam Pengawetan Sampel”. Vol. 5, no. 1 (2017): h.15-17.
Murtinah, dkk. “Pertumbuhan Hutan Tanaman Jati (Tectona grandis Linn.f.) di Kalimantan Timur”. Jurnal AGRIFOR vol.14, no.2 (2015): h.287-292.
Mortensen, Alan. “Carotenoids and other Pigments as Natural Colorants”. Journal of Pure and Applied Chemistry vol.78, no.8 (2006): h. 1477-1491.
Najib, dkk. “Standarisasi Ekstrak Air Daun Jati Belanda dan Teh Hijau”. Jurnal Fitofarmaka Indonesia vol.4, no.2 (2017): h. 241-245.
Noriko, dkk. “Studi Kasus terhadap Zat Pewarna, Pemanis Buatan dan Formalin pada Jajanan Anak di SDN Telaga Murni 03 dan Tambun 04 Kabupaten Bekasi”. Jurnal Al-Azhar Indonesia Seri Sains dan Teknologi vol. 1, no. 2 (2011): h. 47-53.
Nurlela. “Ekstraksi dan Uji Stabilitas Zat Warna Alami dari Bunga Kembang Sepatu (Hibiscus rosasinensis L.) dan Bunga Rosella (Hibiscus sabdariffa L.)”. Skripsi, Jakarta: Fakultas Sains dan Teknologi, 2011.
47
Paryanto, dkk. “Pembuatan Zat Warna Alami dalam Bentuk Serbuk untuk Mendukung Industri Batik di Indonesia”. Jurnal Rekayasa Proses vol. 6, no.1 (2012): h.26-29.
Pedro, dkk. “Extraction of Sunset Yellow and Tratrazine by Ion-pair Formation with Adogen-464 and their Simultaneous Determination by Bivariate Calibration and Derivative Spectrophotometry”. Journal of Analyst vol.122 (1997): h. 1575-1579.
Pujilestrai, Titiek. “Sumber dan Pemanfaatan Zat Warna Alam untuk Keperluan Industri”. Jurnal Dinamika Kerajinan dan Batik vol.32, no.2 (2015): h.93-106.
Purwiyatno, Hariyadi. “Freeze Drying Technology: for Better Quality and Flavor of Dried Product”. Foodreview Indonesia, vol.8, no. 2 (2013): h. 53-56.
Puspitarum, dkk. “Aplikasi Ekstrak Daun Jati (Tectona grandis) sebagai Film Kaca Non Permanen”. (2013): h.7-11.
Putra, dkk. “Gambaran Zat Pewarna Merah pada Saus Cabai yang Terdapat pada Jajanan yang dijual di Sekolah Dasar Negeri Kecamatan Padang Utara”. Jurnal Kesehatan Andalas, vol. 3, no. 3 (2014): h.297-303.
Rivai, dkk. “Pembuatan dan Karakterisasi Ekstrak Kering Simplisia Jati Belanda (Guazuma ulmifolia Lamk.)” Jurnal Farmasi Higea vol.5, no.1 (2013): h. 1-8.
Saati. “Studi Stabilitas Ekstrak Pigmen Antosianin Bunga Mawar Rontok pada Periode Simpan Tertentu (Kajian Keragaman pH Media dan Suhu Pasteurisasi)”. Jurnal Gamma vol.1, no.1 (2005): h.77-82.
Saati, Elfi Anis. “Eksplorasi Pigmen Antosianin Bahan Hayati Lokal Pengganti Rhodamin B dan Uji Efektivitasnya pada Beberapa Produk Industri/ Pangan”. Jurnal Gamma vol. 9, no. 2 (2014): h. 01-12.
Samber, dkk. “Karakteristik Antosianin Sebagai Pewarna Alami”. Seminar Nasional X UNS, 2012.
Saraswati dan Suci Epri Astutik. “Ekstraksi Zat Warna Alami dari Kulit manggis serta Uji Stabilitasnya”. Vol.1, no.1 (2013): h.1-8.
Setiawan, Anderes Pandu. “Potensi Tumbuh-Tumbuhan bagi Penciptaan Ragam Material Finishing untuk Interior”. Vol.1, no. 1 (2003): h.46-60.
Setiono dan Avriliana Dewi A. “Penentuan Jenis Solven dan pH Optimum pada Analisis Senyawa Delphinidin dalam Kelopak Bunga Rosela dengan Metode Spektrofotometri UV-Vis”. Jurnal Teknologi Kimia dan Industri vol.2, no.2 (2013): h.91-96.
Setyowati, dkk. “Skrining Fitokimia dan Identifikasi Komponen Utama Ekstrak Metanol Kulit Durian (Durio zibethinus Murr) Varietas Vetruk”. Seminar Nasional Kimia dan Pendidikan Kimia IV (2014): h. 271-280.
Shihab, M. Quraish. Tafsir Al-Mishbah. Jakarta: Lentera Hati, 2002.
Siregar, Amelia Zuliyanti. “Hama-Hama Dominan Jati (Tectona grandis)”. Skripsi, Sumatera Utara: Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara, 2008.
48
Siregar, Kiman. “Kajian Pengeringan Beku dengan Pembekuan Vakum dan Pemanasan Terbalik untuk Daging Buah Durian”. Skripsi, Bogor: Institut Peranian Bogor, 2014.
Siregar dan Nurlela. “Ektraksi dan Uji Stabilitas Zat Warna Alami dari Bunga Kembang Sepatu (Hibiscus rosa-sinensis L) dan Bunga Rosela (Hibiscus sabdariffa L). Jurnal Kimia vol.2, no.3 (2011): h.459-467.
Supraptini, dkk. “Kualitas Bahan Makanan dan Jajanan yang Dijual di Pasar Tradisional di Beberapa Kota di Indonesia”. Jurnal Ekologi Kesehatan vol.10, no.4 (2011): h. 208-218.
Suprianata, Asep. “Uji Performansi dan Analisa Teknik Alat Evaporator Vakum”. Skripsi, Bogor: Fakultas Teknologi Pertanian, 2008.
Wardani, Laras Andria. “Validasi Metode Analisis dan Penentuan Kadar Vitamin C pada Minuman Buah Kemasan dengan Spektrofotometri UV-Visible”. Skripsi, Depok: Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, 2012.
Xavier, dkk. “Extraction of Red Cabbage Anthocyanins: Optimization of the Operation Conditions of the Column Process”. Journal Brazilian Archives of Biology and Technology vol. 51, no.1 (2008): h.143-152.
Yernisa, dkk. “Aplikasi Pewarna Bubuk Alami dari Ekstrak Biji Pinang (Areca catechu L.) pada Pewarnaan Sabun Transparan”. Jurnal Teknologi Industri Pertanian vol.23, no.3 (2013): h.190-198.
Yuniwati, dkk. “Optimasi Kondisi Proses Ekstraksi Zat Pewarna dalam Daun Suji dengan Pelarut Etanol”. Jurnal Aplikasi Sains dan Teknologi vol.1, no.3 (2012): h. 257-263.
Zulfa, dkk. “Ekstraksi Pewarna Alami dari Daun Jati (Tectona grandis) (Kajian Konsentrasi Asam Sitrat dan Lama Ekstraksi) dan Analisa Tekno-Ekonomi Skala Laboratorium”. Jurnal Industri vol.3, no.1 (2015): h. 62-72.
49
Lampiran 1. Skema Penelitian
Ekstraksi secara maserasi dengan pelarut etanol 96%
Dikeringkan dengan freeze drying
Daun Jati
Ekstrak Etanol Residu
Uji Stabilitas
Pelarut
Serbuk
Uji Kualitatif
Uji Kuantitatif
Uji Organoleptik
Analisis Proksimat
pH
Suhu
Antosianin, Tanin, Saponin dan Alkaloid
Kadar Antosianin
Rasa
Warna
Kadar Abu
Kadar Air
Lama Penyimpanan
50
Lampiran 2. Bagan Prosedur Kerja
1. Penyiapan Bahan
- Dibersihkan
- Dikeringkan pada suhu ruang dan dipotong kecil
- Dihaluskan dengan blender
2. Ekstraksi
- Ditimbang sebanyak 800 gram
- Dimaserasi dengan etanol 96% selama 3 x 24 jam
- Digabungkan masing-masing maserat dan diuapkan dengan
evaporator dan dikeringkan dengan pengering beku (freeze drying)
pada suhu -400C
Daun Jati Muda
Serbuk
Serbuk
Maserat
Serbuk
51
3. Uji Kualitatif Senyawa Fitokimia
a. Uji Antosianin
- Sebanyak 0,5 gram dimasukkan ke dalam tabung reaksi
- + HCl 2 M dan dipanaskan selama 5 menit pada suhu 1000C, apabila
timbul warna merah maka mengandung antosianin
- + NaOH 2 M tetes demi tetes, apabila timbul warna hijau biru yang
memudar maka mengandung antosianin
b. Uji Alkaloid
- Dimasukkan ke dalam cawan porselin sebanyak 0,5 gram
- + 3 mL HCl 2 M diaduk dan didinginkan pada suhu ruang
- + 0,3 gram NaCl diaduk dan disaring
- + 2 tetes HCl 2 M dan dipisahkan menjadi dua bagian A dan B
- Bagian A diuji dengan pereaksi Mayer dan bagian B diuji dengan
pereaksi Wagner
- Apabila terbentuk endapan putih dan coklat maka positif mengandung
alkaloid
Serbuk
Filtrat Residu
Hasil
Serbuk
Hasil
52
c. Uji Tanin
-
- Dimasukkan ke dalam plat tetes dan ditambah 3 tetes FeCl3
- Apabila terjadi perubahan warna menjadi hijau atau biru kehitaman
maka positif mengandung tanin
d. Uji Saponin
- Sebanyak 0,5 gram dimasukkan ke dalam tabung reaksi
- + 10 mL aquades dan dikocok selama 30 detik
- Apabila terdapat busa yang bertahan selama 30 detik maka positif
mengandung saponin
Serbuk
Hasil
Serbuk
Hasil
53
4. Uji Kuantitatif Kadar Antosianin
- Dilarutkan dengan buffer KCl pH 1,0 untuk larutan pertama dan
larutan kedua dengan buffer Na-Asetat pH 4,5
- Diambil 1 mL masing-masing larutan tersebut
- Diencerkan dengan buffer masing-masing sampai volume 10 mL
- Diukur absorbansinya pada panjang gelombang 500-700 nm dan
700 nm
5. Analisis Kadar Air dan Kadar Abu (AOAC, 2015)
a. Kadar Air
- Ditimbang sebanyak 2 gram dalam cawan yang telah diketahui
bobotnya
- Dikeringkan dalam oven pada suhu 1050C selama 3 jam
- Dikeluarkan dan didinginkan dalam desikator dan ditimbang
- Dikeringkan kembali selama 30 menit dan didinginkan serta
ditimbang sampai diperoleh bobot konstan
- Dihitung kadar air yang diperoleh
Sampel
Hasil
Serbuk
Hasil
54
b. Kadar Abu
- Ditimbang sebanyak 2 gram dalam cawan yang telah diketahui
bobotnya
- Dipijarkan dan diabukan dalam tanur pada suhu 6000C selama 4
jam
- Dikeluarkan dan didinginkan dalam dsikator dan ditimbang
- Diabukan kembali sampai diperoleh bobot konstan
- Dihitung kadar abu yang diperoleh
6. Uji Stabilitas
a. Pengaruh Suhu
- Sebanyak 0,5 gram dalam 50 mL aquades
- Dipanaskan pada suhu (40, 60, 80)0C selama 1 jam
- Diukur absorbansinya pada panjang gelombang maksimum
b. Pengaruh pH
- Dibuat 3 tingkat keasaman (pH 2, 4, 6)
- Rentetan serbuk sebanyak 0,5 gram dilarutkan dalam 50 mL
buffer asam sitrat sesuai variasi pH
- Diukur absorbansinya pada panjang gelombang maksimum
Serbuk
Hasil
Serbuk
Hasil
Serbuk
Hasil
55
c. Pengaruh Lama Penyimpanan
- Disimpan pada suhu kamar dengan variasi lama penyimpanan (1,
3, 5) hari
- Dilakukan pengenceran yaitu serbuk dilarutkan sebanyak 0,5 gram
dalam 50 mL aquades
- Diukur absorbansinya pada panjang gelombang maksimum
7. Uji Organoleptik
- Dilarutkan dalam 200 mL air dengan variasi serbuk (1, 2, 3) gram
- + 1½ Sendok teh gula pasir, ditambah sirup 3 sendok dan diaduk
- Diujikan terhadap 25 orang panelis
- Aspek organoleptik yang diamati yaitu warna dan rasa
Serbuk
Hasil
Serbuk
Hasil
56
Lampiran 3. Pembuatan Pereaksi
1. Larutan HCl 2 M dalam 10 mL
V1 x M1 = V2 x M2
10 mL x 2 M = V2 x 12,06 M
V2 = 10 mL x 2 M
12,06 M
V2 = 1,66 mL
2. Buffer Asam Sitrat
a. Larutan x
0,1 larutan asam sitrat (10,505 g asam sitrat dilarutkan dalam 500 mL aquadest).
b. Larutan y
0,1 M larutan natrium sitrat (14,705 g natrium sitrat dilarutkan dalam 500 mL
aquadest).
Tabel Penentuan pH
X (mL) Y (ml) pH
46,5 3,5 3,0
33,0 17,0 4,0
20,5 29,5 5,0
9,5 41,5 6,0
3. Buffer KCl-HCl
a. Larutan A
Timbang 7,46 g KCl 0,2 M, masukkan ke dalam labu takar 500 mL dan
encerkan.
57
b. Larutan B
HCl 0,2 M dalam 100 mL
V1 x M1 = V2 x M2
100 mL x 0,2 M = V2 x 12,06 M
V2 = 10 mL x 2 M
12,06 M
V2 = 1,66 mL
Tabel Penentuan pH
A (mL) + pH
B (mL) C (mL)
67,06 8,0 1,0
6,5 68,5 2,0
Keterangan: A = 25 mL KCl 0,2 M
B = HCl 0,2 M
C = Aquadest
4. Buffer Natrium Asetat
Larutan A= 0,2 M larutan asam asetat (11,55 mL dalam 1000 mL)
Larutan B= 0,2 M larutan natrium asetat (16,4 g dalam 1000 mL)
Penentuan volume larutan yang ditambahkan berdasarkan tabel berikut:
Tabel Penentuan pH
X (mL) Y (mL) pH
25,5 24,5 4,6
20,0 30,0 4,8
58
Untuk membuat buffer asetat pH 4,5, maka sebanyak 5,8 mL larutan A
ditambahkan dengan 33,2 mL larutan B kemudian diencerkan sampai 100 mL.
5. Pereaksi FeCl3
Timbang FeCl3 sebanyak 0,25 g kemudian encerkan dalam labu takar 5 mL.
6. Pereaksi Mayer
a. Larutan A
Timbang HgCl2 sebanyak 1,36 g kemudian dilarutkan dalam 60 mL
aquadest.
b. Larutan B
Timbang KI sebanyak 5 g kemudian dilarutkan dalam 10 mL aquadest.
Untuk membuat pereaksi Mayer, tuangkan larutan A dan larutan B ke dalam
labu takar 100 mL kemudian himpitkan hingga tanda batas.
7. Pereaksi Wagner
Dibuat dengan cara 10 mL aquadestdipipet kemudian ditambahkan 2,5 g iodin
dan 2 g iodida kemudian dilarutkan dan diencerkan dalam labu takar 200 mL
hingga tanda batas.
59
Lampiran 4. Perhitungan Hasil Uji Kuantitatif Kadar Antosianin
1. Untuk menghitung absorbansi
a. Simplo
Diketahui: Abs λmax pH 1,0 = 0,155
Abs λ700nm pH 1,0 = 0,018
Abs λmax pH 4,5 = 0,129
Abs λ700nm pH 4,5 = 0,014
Ditanyakan: Absorbansi =....?
Penyelesaian:
A = (Amax – A700nm)pH 1,0 – (Amax – A700nm)pH 4,5
= (0,155 – 0,018)pH 1,0 – (0,129 – 0,014)pH 4,5
= 0,137 – 0,115
= 0,022
b. Duplo
Diketahui: Abs λmax pH 1,0 = 0,156
Abs λ700nm pH 1,0 = 0,023
Abs λmax pH 4,5 = 0,127
Abs λ700nm pH 4,5 = 0,012
Ditanyakan: Absorbansi =....?
Penyelesaian:
A = (Amax – A700nm)pH 1,0 – (Amax – A700nm)pH 4,5
= (0,156 – 0,023)pH 1,0 – (0,127 – 0,012)pH 4,5
= 0,133 – 0,115
= 0,018
60
2. Unruk menghitung total antosianin
Diketahui: Abs. simplo = 0,022
Abs. duplo = 0,018
MW = 449,2
DF = 10
ε = 26.900
l = 1
Ditanyakan: MAP = ...?
Penyelesaian:
a. Simplo
MAP (mg/L) = A x MW x DF x 1000
ε x l
= 0,022 x 449,2 x 10 x 1000
26.900 x 1
= 98824
26900
= 3,674 mg/L
b. Duplo
MAP (mg/L) = A x MW x DF x 1000
ε x l
= 0,018 x 449,2 x 10 x 1000
26.900 x 1
= 80856
26900
= 3,006 mg/L
Total MAP = 3,34 mg/L
61
Lampiran 5. Perhitungan Hasil Analisis Proksimat
1. Kadar air
a. Simplo
Bobot sampel = 2,0007 gr
W1 (B. kosong + B. sampel) = 33,9466 gr
W2 = 33,7486 gr
% air = w1 - w2
B. sampel ×100%
= 33,9466 - 33,7486
2,0007 ×100%
= 0,198
2,0007 ×100%
= 9,8 %
b. Duplo
Bobot sampel = 2,0000 gr
W1 (B. kosong + B. sampel) = 42,8064 gr
W2 = 42,6284 gr
% air = w1 - w2
B. sampel ×100%
= 42,8064 - 42,6284
2,0000 ×100%
= 0,178
2,0000 ×100%
= 8,9 %
2. Kadar abu
a. Simplo
Bobot sampel = 2,0007 gr
Bobot cawan + Abu = 32,0328 gr
Bobot kosong = 31,9459 gr
62
% abu = b - a
B. sampel ×100%
= 32,0328−31,9459
2,0007 ×100%
= 0,0869
2,0007 ×100%
= 4,34 %
b. Duplo
Bobot sampel = 2,0000 gr
b = 40,8894 gr
a = 40,8064 gr
% abu = b - a
B. sampel ×100%
= 40,8894−40,8064
2,0000 ×100%
= 0,0869
2,0000 ×100%
= 4,15 %
63
Lampiran 6. Uji Organoleptik Menggunakan ANOVA
1. Pengaruh Terhadap Warna
No. Panelis Tingkat Kesukaan
Kode A 1 gr/200 mL Kode B 2 gr/200 mL Kode C 3 gr/200 mL
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
7
7
5
7
9
7
7
7
9
7
7
5
9
9
7
5
5
9
7
9
7
7
7
7
7
5
3
5
5
7
5
5
5
7
7
9
9
5
7
3
7
7
7
5
5
5
5
5
3
7
5
3
3
5
3
5
5
5
3
3
3
7
7
3
3
5
3
3
5
5
9
3
3
3
5
Keterangan Peniliaian:
Sangat suka = 9
Suka = 7
Biasa = 5
Tidak Suka = 3
64
Anova: Single Factor
SUMMARY
Groups Count Sum Average Variance
Column 1 25 179 7,16 1,64
Column 2 25 143 5,72 2,626667
Column 3 25 107 4,28 2,626667
ANOVA
Source of
Variation SS df MS F
P-
value F crit
Between
Groups 103,68 2 51,84 22,56093
2,47E-
08 3,123907
Within
Groups 165,44 72 2,297778
Total 269,12 74
Hipotesis: H0 = tidak ada pengaruh tiap penambahan konsentrasi terhadap
warna.
H1 = ada pengaruh tiap penambahan konsentrasi terhadap warna.
Kriteria pengujian:
H0 diterima jika FHitung ≤ FTabel
H0 ditolak jika FHitung ≥ FTabel
65
2. Pengaruh Terhadap Aroma
No. Panelis Tingkat Kesukaan
Kode A 1 gr/200 mL Kode B 2 gr/200 mL Kode C 3 gr/200 mL
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
9
7
7
9
7
5
7
7
9
5
7
5
7
3
7
5
5
7
5
9
5
9
7
7
9
3
7
5
7
5
5
7
7
7
7
7
7
7
7
5
7
7
9
7
7
7
7
5
5
7
3
5
3
7
5
5
5
5
3
5
5
7
5
5
3
3
3
5
3
3
9
7
5
3
5
Keterangan Peniliaian:
Sangat suka = 9
Suka = 7
Biasa = 5
Tidak Suka = 3
66
Anova: Single Factor
SUMMARY
Groups Count Sum Average Variance
Column 1 25 169 6,76 2,773333
Column 2 25 161 6,44 1,506667
Column 3 25 117 4,68 2,56
ANOVA
Source of
Variation SS df MS F P-value F crit
Between Groups 62,72 2 31,36 13,75439 8,73E-06 3,123907
Within Groups 164,16 72 2,28
Total 226,88 74
Hipotesis: H0 = tidak ada pengaruh tiap penambahan konsentrasi terhadap aroma.
H1 = ada pengaruh tiap penambahan konsentrasi terhadap aroma.
Kriteria pengujian:
H0 diterima jika FHitung ≤ FTabel
H0 ditolak jika FHitung ≥ FTabel
67
3. Pengaruh Terhadap Rasa
No. Panelis
Tingkat Kesukaan
Kode A 1 gr/200 mL Kode B 2 gr/200 mL Kode C 3 gr/200
mL
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
5
7
7
9
9
7
7
7
7
5
7
9
7
7
7
9
9
9
9
7
7
7
7
5
5
3
5
7
9
7
7
3
7
7
7
7
5
5
5
5
5
7
7
7
7
7
7
3
5
5
3
5
5
7
5
9
3
3
5
3
7
3
3
5
3
5
5
3
5
5
3
5
3
3
5
Keterangan Peniliaian:
Sangat suka = 9
Suka = 7
Biasa = 5
Tidak Suka = 3
68
Anova: Single Factor
SUMMARY
Groups Count Sum Average Variance
Column 1 25 181 7,24 1,773333
Column 2 25 149 5,96 2,373333
Column 3 25 111 4,44 2,506667
ANOVA
Source of
Variation SS df MS F P-value F crit
Between Groups 98,24 2 49,12 22,1483 3,19E-08 3,123907
Within Groups 159,68 72 2,217778
Total 257,92 74
Hipotesis: H0 = tidak ada pengaruh tiap penambahan konsentrasi terhadap rasa.
H1 = ada pengaruh tiap penambahan konsentrasi terhadap rasa.
Kriteria pengujian:
H0 diterima jika FHitung ≤ FTabel
H0 ditolak jika FHitung ≥ FTabel
69
Lampiran 7. Preparasi Sampel
Preparasi Sampel Dihaluskan dengan blender
Menimbang sampel Maserasi 1 Maserat 1
Maserasi 2 Maserat 2 Maserasi 3
70
Maserat 3 Diuapkan dengan Evaporator Ekstrak Kental
Dimasukkan dalam capet Dikeringan (Freeze Drying) Serbuk
71
Lampiran 8. Uji Kualitatif Senyawa Fitokimia
a. Uji Antosianin
Menimbang serbuk Penambahan HCl (+) Penambahan NaOH
b. Uji Alkaloid
Menimbang Serbuk Ekstrak Etanol Mayer (-) dan Wagner (+)
c. Uji Tanin
Menimbang Serbuk Ekstrak Etanol (+)Warna Hijau Kehitaman
72
d. Uji Saponin
Menimbang Serbuk Terbentuk Busa (+)
73
Lampiran 9. Uji Kuantitatif Antosianin Menimbang Serbuk Ekstrak Etanol (pH 1) Ekstrak Etanol (pH 4,5)
74
Lampiran 10. Analisis Proksimat
a. Kadar Air
Bobot Cawan Kosong 1 Bobot Cawan+Sampel 1 Bobot konstan 1
Bobot Cawan Kosong 2 Bobot Cawan+Sampel 2 Bobot Konstan 2
b. Kadar Abu
Bobot Cawan Kosong Bobot Cawan+Sampel 1 Bobot Cawan+Abu
75
Bobot Cawan Kosong 2 Bobot Cawan+Sampel 2 Bobot Cawan+Abu
76
Lampiran 11. Uji Stabilitas
a. Pengaruh Suhu
Suhu 40 ℃ Suhu 60℃ Suhu 80℃
b. Pengaruh pH
Buffer pH 2 Buffer pH 4 Buffer pH 6
c. Pengaruh Lama Penyimpanan
Hari Kedua Hari Kelima Hari Kedelapan
77
Lampiran 12. Uji Organoleptik
Minuman dari perbedaan konsentrasi pemberian pewarna Pengujian Warna
Pengujian Rasa Pengujian Aroma
Pengujian Angket di perumahan Griya Antang Harapan
78
RIWAYAT HIDUP
Dian Mutmainnah atau biasa dipanggil Dian,
lahir di Desa Pao, Kec. Tarowang, Kab. Jeneponto pada
tanggal 24 Desember 1997. Penulis lahir sebagai anak
bungsu dari empat bersaudara dari pasangan suami istri,
ayah bernama Rappung dan Ibu bernama Sitti Wardi.
Penulis memulai pendidikan di bangku sekolah dasar
yaitu SD Inp. 252 pao pada tahun 2002 dan lulus pada
tahun 2008. Kemudian melanjutkan ke jenjang
selanjutnya di tingkat menengah pertama yaitu SMP Negeri 1 Tarowang pada tahun
2008 dan lulus pada tahun 2011. Setelah itu, melanjutkan pendidikan ke tingkat
menengah atas yaitu SMA Negeri 1 Bantaeng pada tahun 2011 dan lulus pada tahun
2014. Penulis kembali melanjutkan pendidikan ke jenjang yang lebih tinggi yaitu di
tingkat strata 1 yaitu UNIVERSITAS ISLAM NEGERI ALAUDDIN MAKASSAR
jurusan KIMIA di fakultas SAINS DAN TEKNOLOGI.